* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

121 , П И Т А Т Е Л Ь Н Ы Е СРЕДЫ твором N a O H . Е с л и с р е д а б ы л а щ е л о ч н а я , т о ее т и т р у ю т п / - н ы м р а с т в о р о м Н С 1 . Методы т и т р о в а н и я н а л а к м у с и ф е н о л ф т а ­ леин о п р е д е л я ю т « т о т а л ь н у ю » к и с л о т н о с т ь и л и щелочность П . с , т . е. а б с о л ю т н о е к о л и ч е с т в о содержащейся в ней к-ты и л и щелочи. Пригод­ ность ж е с р е д ы д л я т о г о и л и и н о г о м и к р о б а зависит от ее а к т и в н о й р е а к ц и и . О п р е д е л е н и е концентрации водородных ионов в лаборатор-& ной п р а к т и к е м о ж н о п р о и з в о д и т ь д в о я к и м п у т е м : электрометрическим и колориметрическим или методом и н д и к а т о р о в . П о с л е д н и й м е т о д п о своей п р о с т о т е н а и б о л е е применим, д л я п р а к т и ­ ческих ц е л е й в б а к т е р и о л . л а б о р а т о р и я х . К о ­ л о р и м е т р и ч е с к и й , м е т о д построен на с р а в н е н и и ц в е т а и л и о т т е н к а ц в е т а и с п ы т у е ­ мой ж и д к о с т и с т а к о в ы м с т а н д а р т н ы х р а с т в о ­ ров ( р Н к о т о р ы х з а р а н е е о п р е д е л е н ы э л е к т р о ­ м е т р и ч е с к и м способом) п р и п р и б а в л е н и и к тем и другим одних и тех же индикаторов. Н а и ­ более у п о т р е б и т е л е н способ М и х а е л и с а , п р и котором о п р е д е л е н и е р Н в е д е т с я п р и л ю б о й t ° и без п р и м е н е н и я б у ф е р о в . М и х а е л и с в в е л т а к наз. д л и н н ы й и н д и к а т о р н ы й р я д ( I n d i k a t o r dauerreihe), п о с т р о е н н ы й и з о д н о ц в е т н ы х и н д и ­ каторов р я д а нитрофенола. Р а с т в о р ы этих ин­ дикаторов д е р ж а т с я безгранично долго; поэто­ му о н и не п р и г о т о в л я ю т с я ex tempore, а и м е ю т ­ ся в з а п а я н н ы х п р о б и р к а х . Н а б о р , п о М и х а елису, содержит растворы с постепенно н а р а ­ стающей щ е л о ч н о с т ь ю от 2,4 до 8,4; п р а к т и ч е ­ ски. пользоваться приходится двумя рядами: 1)с meta-Nitrophenol&oM в к а ч е с т в е и н д и к а т о р а , р Н от 6,8 до 8,4 и 2) p a r a - N i t r o p h e n o l & o M , р Н от 5,4 до 7,0. Д л я о п р е д е л е н и я а к т и в н о й к и ­ слотности с р е д ы п о с л е д н я я н а л и в а е т с я в п р о ­ б и р к у (6 см ), • к н е й п р и б а в л я е т с я и з в е с т н о е к о л и ч е с т в о (1 см ) и н д и к а т о р а , и п о л у ч е н н ы й оттенок ц в е т а с р а в н и в а е т с я " с р я д о м М и х а е л и с а . Ч и с л о н а с т а н д а р т н о й п р о б и р к е соответствует рН р а с т в о р а . Д л я п р и б а в л е н и я к с р е д е у п о т р е ­ бляются следующие основные растворы индика­ т о р о в : 1) p - N i t r o p h e n o l — 0 , 1 % - н ы й в о д н ы й р а ­ с т в о р ; 2) m - N i t r o p h e n o l — 0 , 3 % - н ы й в о д н ы й р а ­ створ. Главным источником ошибки при таком способе я в л я е т с я с о б с т в е н н ы й ц в е т и м у т н о с т ь р а с т в о р а . Д л я у м е н ь ш е н и я и х П . с. м о ж н о р а з ­ водить дест. в о д о й ; т а к к а к П . с. б о г а т ы б у ф е р ­ ными в е щ е с т в а м и , т о р е а к ц и я и х п р и этом с у щ е ­ ственно н е м е н я е т с я . Е щ е л у ч ш е этот и с т о ч н и к ошибки устраняется пользованием к о м п а р а ­ торами, построенными на принципе У о л п о л я (см.& Индикаторный метод), где цве^ испытуе-» мой ж и д к о с т и (с и н д и к а т о р о м ) с р а в н и в а е т с я со с т а н д а р т н ы м н а фоне т о й ж е ж и д к о с т и без индикатора. Д л я наблюдения за изменением р Н с р е д ы в о в р е м я р о с т а м и к р о б о в удобнееч прибавлять индикаторы к среде; д л я этой цели употребляются более стойкие двукрасочные и н д и к а т о р ы ( р я д C l a r k & a и Lubs&a), к - р ы е м о ж н о стерилизовать в автоклаве. Наиболее употре­ б и т е л ь н ы е и н д и к а т о р ы : б р о м к р е з о л п у р п у р (да­ ет и з м е н е н и е ц в е т а м е ж д у р Н 5,2—6,8, ж е л т ы й — пурпурный), бромтимоловая синька (Bromthymolblau, р Н — 6 , 0 — 7 , 6 , ж е л т ы й — с и н и й ) , ф е н о л рот ( р Н — 6 , 8 — 8 , 4 , ж е л т ы й — - к р а с н ы й ) и к р е з о л р о т ( р Н — 7 , 2 — 8,8, ж е л т ы й — к р а с н ы й ) . Н а 1 л среды п р и б а в л я ю т 1 см с п и р т н о г о 1 , 6 % - н о г о раствора одного и з этих и н д и к а т о р о в . 10 3 3 1 3 н у ю в о р о н к у , п р о с т е р и л и з о в а н н у ю и еще г о р я ­ чую , или через металлическую двойную ворон­ к у (содержащую между стенками горячую в о д у , см. Воронка, р и с . 10 и 11). М о ж н о ф и л ь т р о ­ вать а г а р , поместив колбу и в о р о н к у в К о х о в с к и й а п п а р а т ( п р и 100°). И н о г д а п р и х о д и т с я прибегать к одному из методов просветления, с р е д и к - р ы х н а и б о л е е у п о т р е б и т е л ь н о просвет^ л е н и е к у р и н ы м б е л к о м : на* 1 л и т р П . с . п р и 50° п р и б а в л я ю т б е л о к о д н о г о я й н а , т щ а т е л ь н о р а з б о л т а н н ы й в 100 см х о л о д н о й в о д ы , с м е ш и ­ в а ю т со с р е д о й и п о с л е н а г р е в а н и я ее о т ф и л ь ­ тровывают х л о п ь я белка, которые захватывают все в з в е ш е н н ы е в П . с . ч а с т и ц ы . Р а з л и в а ю т с я П. с. в с т е к л я н н у ю б а к т е р и о л . п о с у д у , п р е д в а р и ­ тельно простерилизованную сухим ж а р о м . Р а з ­ л и в к а производится при помощи стеклянной в о р о н к и , ниясний к о н е ц к о т о р о й с о е д и н е н к а у ­ ч у к о в о й т р у б к о й со с т е к л я н н ы м н а к о н е ч н и к о м : на трубку надевается зажйм. Д л я разливки агара - воронка предварительно прогревается. С т е р и л и з а ц и я П . с. М я с о П е п т о н н ы й бульон и агар стерилизуются в автоклаве при 120° в т е ч е н и е 20—30 м и н у т . Д р у г и е , П . с . не в ы д е р ж и в а ю т с и л ь н о г о н а г р е в а н и я . Ж е л а ­ тина стерилизуется текучим паром в аппарате К о х а (см?. Коха аппарат) п р и 100° п о 20—30 минут 3 дня подряд (дробная стерилизация). П р и п р и м е н е н и и . более в ы с о к о й t ° ж е л а т и н а теряет способность застывать п р и о х л а ж д е н и и . Среды с у г л е в о д а м и с т е р и л и з у ю т с я д р о б н о т е ­ к у ч и м п а р о м (3 д н я п о д р я д п о 15 м и н . ) , т а к к а к п р и более в ы с о к о й т е м п , о н и л е г к о и з м е н я ю т с я . Некоторые среды ( к р о в я н а я сыворотка) стери­ л и з у ю т с я п р о г р е в а н и е м п р и 56—-58° в т е ч е н ц е 3 часов или фильтруются (для обеспложивания) через бактериальные фильтры (свечи), фильтры З е й ц а . — Г о т о в ы е П . с. с о х р а н я ю т с я в темном и п р о х л а д н о м м е с т е , з а щ и щ е н н о м от п ы л и и в ы ­ с ы х а н и я . Л у ч ш е з а к р ы в а т ь п р о б и р к и со с р е д а ­ м и ( е с л и они и с п о л ь з у ю т с я не с р а з у ) р е з и н о в ы м и колпачками или заливать пробку парафином, а пробки колб накрывать бумажными покрыш­ к а м и . Свежие плотные П . с. обладают известной степенью в л а ж н о с т и , что в ы р а ж а е т с я м е ж д у п р о ч и м в с к о п л е н и и н е к - р о г о к о л и ч е с т в а «кон­ денсационной» воды, образующейся при засты­ в а н и и , у п л о т н е н и и , «конденсации» среды в н и ­ ж н и х ч а с т я х п р о б и р к и с плотной средой. От­ сутствие конденсационной воды указывает на сухость среды. 3 П . с. д о л ж н ы б ы т ь п р о з р а ч н ы м и , д л я ч е г о и х ф и л ь т р у ю т : , жидкие среды—через двой­ ной с к л а д ч а т ы й , п р е д в а р и т е л ь н о у в л а ж н е н н ы й бумажный фильтр; расплавленный питательный агар—быстро через вату, в л о ж е н н у ю в с т е к л я н ­ С у х и е с р е д ы впервые предложены Д е р р о м (Doerr, 1909). О б ы ч н ы м о б р а з о м п р и ­ готовленный агар р а з ж и ж а е т с я , охлаждается до 50—-60° и р а з л и в а е т с я в б о л ь ш и е с у х и е сте­ рилизованные&чашки из прочного стекла. Агар в ы с у ш и в а е т с я в т е р м о с т а т е п р и 37°; п р и р а з ­ л и в к е его т о н к и м с л о е м в ы с у ш и в а н и е п р о и с х о ­ д и т с р а в н и т е л ь н о б ы с т р о ; ч е р е з 12—20 ч а с о в питательная масса размельчается в порошок; среда хранится в металлической коробке. Пе­ ред употреблением порошок в определенном количестве смешивается с водой и нагревается в колбе. Сухие среды получаются путем высу­ шивания и из ж и д к и х веществ. Приготовляют­ с я и с л о ж н ы е с р е д ы . В п р о д а ж е и м е ю т с я пи­ тательный а г а р , ж е л а т и н а , бульон, среды Дьедонне, Биттера, Эндо, Дригальского, Гаснера и др. Примеру Дерра последовали другие ав­ т о р ы , давшие свои рецепты приготовления су­ х и х П . с. Т а к , М а р к с ( M a r x ) п р е д л о ж и л з а м е ­ нять мясную воду Магги; исходя из этого, фир­ ма Мерк приготовила рагит-агар, содержащий М а г г и , а г а р и ц е п т о н и п р е д с т а в л я ю щ и й соблй