* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

389 И Н Д И К А Т О Р Н Ы Й М Е Т О Д 390 к а ж д о м у р Н соответствуют о п р е д е л е н н а я точка кривой данного индикатора и опреде­ л е н н а я его о к р а с к а . В м е с т о т о ­ г о , чтобы и з м е р я т ь р Н п р и п о ­ Соотношение мощи стандартных буферных капель р а с т в о р о в , м о ж н о найти е г о , щ е л о ч ь : к-та н е п о с р е д с т в е н н о определив сте­ пень д и с с о ц и а ц и и индикато­ р а . П о м е с т и м д л я этого н а п у ­ 1:9 ти светового л у ч а два р а с т в о р а 2:8 индикатора—кислый и щелоч­ 3:7 н о й . В одном из них все мо­ 4:6 5:5 лекулы и н д и к а т о р а будут в 6:4 диссоциированном, в другом— 7:3 в недиссоциированном состоя­ 8:2 н и и . С в е т о в о й л у ч , пройдя ч е ­ 9 : 1 рез оба раствора, очевидно приобретет т а к у ю ж е о к р а с к у , к а к если бы д и с с о ц и и р о в а н н ы е и н е д и с с о ц и и р о в а н ные м о л е к у л ы и н д и к а т о р а н а х о д и л и с ь в м е ­ сте в о д н о м р а с т в о р е . П р и г о т о в и м н а п р и ­ м е р с данным и н д и к а т о р о м с л е д у ю щ и е д е ­ вять п а р р а с т в о р о в : 1) 1 к а п л я и н д и к а т о р а в щелочном р а с т в о р е и 9 капель в к и с л о м , 2) 2 к а п л и в щ е л о ч н о м и 8 капель в к и с ­ л о м . . . ^ ) 9 капель в щелочном и 1 к а п л я в кислом. Путем колориметрического с р а в ­ н е н и я найдем теперь п р и к а к о м р а с п р е д е ­ лении и н д и к а т о р а м е ж д у к и с л о й и щ е л о ч ­ ной жидкостью получится о к р а с к а , т о ж ­ дественная с о к р а с к о й 10 к а п . и н д и к а т о р а в исследуемом р а с т в о р е . Р а с п о л о ж е н и е р а с ­ творов и з о б р а ж е н о н а схеме I I ; для получе­ н и я его п о л ь з у ю т с я к о м п а р а т о р о м . У о л п о л я , описанным выше. Полученное соотношение н е п о с р е д с т в е н н о дает степень д и с с о ц и а ц и и и н д и к а т о р а , а следовательно и р Н р а с т в о р а . I Кислый раствор Вода т р о ф е н о л ы ; в р а с т в о р е , более к и с л о м , чем и х з о н а п е р е х о д а , о н и бесцветны. П о э т о м у . М Еромфенолблау Бромр е з о л р о т Л > Inypnyp Бром- ФенолКре­ Тимолтимолрот зол-рот блау блау 1 3,1 3,5 3,7 3,9 4Д 4,3 4,5 4.7 5,0 4,05 4,4 4,6 4,8 5,0 5.2 5,4 5,6 5,95 5,3 5,7 5,9 6,1 6,3 6,5 6,7 6,9 7,2 6,15 6.5 6,7 6,9 7,1 7.3 7^5 7.7 8,05 6,75 7Д 7,3 7,5 7.7 7,9 8,1 8,3 8,65 7,15 7,5 7,7 7,9 8,1 8.3 8,5 8,7 9,05 7,85 8,2 8,4 8,6 8,8 9,0 9,2 9,4 9,75 з а д н и е р а с т в о р ы н а с х е м е I I м о г у т быть о т ­ б р о ш е н ы . Степень д и с с о ц и а ц и и и н д и к а т о р а в данном случае просто равняется отноше­ н и ю его к о л и ч е с т в а в щ е л о ч н о м р а с т в о р е к его с о д е р ж а н и ю в и с с л е д у е м о м р а с т в о р е ( к о ­ н е ч н о п р и у с л о в и и , если и н д и к а т о р п р е д ­ ставляет с л а б у ю о д н о о с н о в н у ю к и с л о т у ) . В в и д у т о г о , что н и т р о ф е н о л ы и д и н и т р о ф е н о л ы о т л и ч а ю т с я с р е д и одноцветных и н д и ­ к а т о р о в з н а ч и т е л ь н о й стойкостью, М и х а е л и с ( M i c h a e l i s ) п р е д л о ж и л готовить и з н и х п о о п и с а н н о м у здесь с п о с о б у постоянные с е р и и растворов (содержащие различные количе­ ства данного и н д и к а т о р а в щелочной среде), с р а в н е н и е с к-рыми н е п о с р е д с т в е н н о дает и с ­ к о м о е р Н . Б е з б у ф е р н ы й метод и о п и с а н н ы е его у п р о щ е н и я о с о б е н н о у д о б н ы д л я быст­ р о г о ориентировочного измерения реакции. К о л о р и м е т р и я тканей. Для из­ м е р е н и я р Н б е р у т о б ы ч н о 5 — 1 0 см и с с л е ­ дуемого р а с т в о р а . У м е н ь ш а я р а з м е р ы к о м ­ п а р а т о р а , м о ж н о п о н и з и т ь это ч и с л о д о 1 см . Ч т о б ы и з м е р и т ь е щ е м е н ь ш и е к о л и ч . , н а п р . о д н у к а п л ю ж и д к о с т и , ее с р а в н и в а ю т с серией капель стандартных смесей, п р и ­ б а в л я я к ним п о в о з м о ж н о с т и одинаковые капли индикатора. Различия о к р а с к и бо­ лее з а м е т н ы , е с л и н а б л ю д а т ь и х н а ч и с т о м белом ф о н е , н а п р и м е р н а белой ф а р ф о р о ­ вой пластинке. Г р е ф ( G r a f f ) воспользовался этим п р и е м о м д л я и з м е р е н и я р е а к ц и и т к а ­ ней, маленькие к у с о ч к и которых он быстро р а с т и р а л для о с в о б о ж д е н и я тканевого с о к а . О д н а к о такое раздавливание тканей вызы­ вает значительное посмертное смешение и х р е а к ц и и (в к и с л у ю с т о р о н у ) и н е дает п р а ­ вильного представления о р Н ж и в о й ткани (более грубые р а з л и ч и я между р Н р а з л и ч ­ н ы х т к а н е й в с е ж е м о г у т быть этим с п о с о ­ б о м у л о в л е н ы ) . О ш и б к а м о ж е т быть з н а ­ чительно у м е н ь ш е н а , если р а з д а в л и в а е м у ю ткань предварительно сильно охлаждать и з а м о р а ж и в а т ь ( ж и д к и м в о з д у х о м ) . П р и этом о д н а к о метод Г р е ф а , не д е л а я с ь в п о л н е н а ­ д е ж н ы м и б е з у п р е ч н ы м , теряет с в о е г л а в н о е п р е и м у щ е с т в о — п р о с т о т у и легкость в ы п о л ­ нения. И з б е ж а т ь опасности посмертного и з ­ менения внутриклеточной реакции м о ж н о т о л ь к о и з м е р я я р Н ж и в о й т к а н и . Это о к а з а ­ лось возможным с развитием микрургичес к и х методов ( с м . Микрургия), позволяющих вводить в ж и в у ю к л е т к у любые ( н е я д о в и т ы е д л я нее!) и н д и к а т о р ы . Ш м и д т м а н ( S c h m i d t m a n n ) , п р о и з в о д я у к о л клетки м и к р о и г л о й , вводила приклеенную к последи, к р у п и н к у 3 3 + (10— п)капель индикатора Исследуемая жидкость + 10 капель индикатора Щелочной раствор + п капель индикатора Схема I I . Е с л и и н д и к а т о р представляет с л а б у ю к и с ­ л о т у , то в щ е л о ч н о м р а с т в о р е о б р а з у е м а я им с о л ь п о л н о с т ь ю д и с с о ц и и р о в а н а . Р а с п р е ­ деление и н д и к а т о р а м е ж д у щ е л о ч н ы м и к и с ­ лым р а с т в о р о м , р а в н о е н а п р . 3 : 7 , с о о т в е т ­ ствует степени д и с с о ц и а ц и и 0 , 3 . П р и с о о т ­ н о ш е н и и 5 : 5 степень д и с с о ц и а ц и и р а в н а 0 , 5 , а р Н р а в н я е т с я точке п е р е х о д а данного индикатора. Для нескольких индикаторов определяемые т а к и м о б р а з о м з н а ч е н и я р Н приведены в таблице ( п о и з м е р е н и я м Гилсп а я , для 2 5 — 3 0 ° ) . Измерение еще больше у п р о щ а е т с я при п о л ь з о в а н и и одноцветными и н д и к а т о р а м и , у к-рых т о л ь к о о д н а ф о р м а о к р а ш е н а , д р у ­ гая ж е совершенно бесцветна. Т а к о в ы н а п р . фенолфталеин и р а з л и ч н ы е нитро- и дини- •13