* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

77 КУЛЬТУРЫ ТКАНЕЙ 78 П л о т н а я часть среды (рис. 1—а), в которой находится экплянтируемый кусо­ чек ткани (рис. 1—е), состоит из плазмы крови с примесью разведенного эмбриональ­ ного сока; ж и д к а я часть среды (рисунок 1—Ъ)—обыкновенно из жидкости Тироде ъ--ЩШ=^ пробирках по спо¬ собу Карреля, Риверса, Гаагена ч^Щ и Муккенфуса (Rivers, Haagen u. Muckenfuss) [рисунок 2 (а и Ъ—два Р и с . 2. слоя среды; с — тканевая культу­ ра)], по Шампи (Champy), в фла­ коне Борреля (Borrel), в специальных кажерах, сосудах и т. д. 2. С р е д ы д л я т к а н е в ы х к у л ь ­ т у р . Наилучшей средой для тканевых куль­ т у р до настоящ. времени считается с в е р ­ н у в ш а я с я п л а з м а к р о в и (в к-рой сеть фибрина является хорошей опорой для передвигающихся и размножающихся кле­ ток), смешанная обыкновенно с эмбриональ­ ным соком (или,с разведенным эмбриональ­ ным экстрактом), иногда с протеозами и т. п. а н и е т к а н е и в с желательно иметь тканевые культуры в ж и д к и х сре­ д а х (т. к. п л а з м а н е р е д к о с и л ь н о з а т р у д н я е т с п е ц и а л ь ­ ные исследования, напр. при темнопольном освеще­ нии, при разных микроскопическо-химических пробах и т. п.), то п о л ь з у ю т с я средой Л о к к - Л ь ю и с а , одним э м ­ бриональным экстрактом, гемолимфой (Гольдшмидт), ж и д к о с т ь ю Д р у ( с м . Дру раствор), смесью сыворотки с раствором Тироде и т. п.; но д л я получения роста ж и д к а я среда должна быть распределена очень тон­ ким слоем, чтобы ткань и клетки не плавали в капле жидкости, а были п р и ж а т ы к стеклу, к-рое и будет служить опорой; в указанных жидких средах растут о б ы ч н о л и щ ь э м б р и о н а л ь н ы е т к а н и (от з а р о д ы ш е й р а н н и х с т а д и е в , н а п р . к у р и н ы е з а р о д ы ш и от 5 до 11 д н е й ) и л и ш ь н е д о л г о е в р е м я . П р и б а в л е н и е ф и б р и ­ ногена (Ebeling) оказалось непрактичным; вместо этого К а р р е л ь в& последнее в р е м я пользуется свер­ н у в ш е й с я п л а з м о й (в ч а ш к е К а р р е л я ) , и з к - р о й с ы в о ­ р о т к а у д а л е н а п р о м ы в а н и е м . Э м б р и о й а л ь н ы й с&ок к а ­ ж д ы й р а з п р и г о т о в л я ю т с в е ж и й : ч а щ е всего берут 7 — 1 0 - д н е в н ы й к у р и н ы й з а р о д ы ш , и з м е л ь ч а ю т его н а кусочки и центрифугируют; полученный эмбрио­ нальный сок обыкновенно разводят раствором Тироде и л и Р и н г е р - Л о к к а . П р и приготовлении сред обра­ щают внимание па то, чтобы среда была изотонична (или слегка гипотонична), имела бы соответствующую р е а к ц и ю , и т. д. 3. П р и г о т о в л е н и е тканевых к у л ь т у р . Ткани для эксплянтации пре­ парируются при соблюдении строгой асеп­ тики в растворе Тироде или Рингер-Локка острыми инструментами (катарактальным— глазным—ножом Грефе или небольшими ножницами) и разрезаются на маленькие ку­ сочки с поперечником чаще всего приблизи­ тельно в 1 мм (0,5—2,0 мм). В зависимости от разных условий размеры эксплянтата могут варьировать. Д л я эксплянтации лейкоцитов крови поступают обыкновенно так: нормальную или лейкемическую кровь человека или животных сильно центрифуги­ руют, плазму отсасывают, на оставшийся слой лей­ коцитов (расположенный над эритроцитами) спу­ скают несколько капель эмбрионального сока; когда л е й к о ц и т а р н ы й слой свернется в виде п л е н к и , ее промывают и режут на кусочки и эксплянтируют, как и кусочки ткани. Можно воспользоваться для эксплянтации и клетками эксудатов. Сравнительно легко удаются тканевые культуры из перевиваемых опухолей животных. Если опухоль разжижает плазму, то предпочтительнее к у л ь т и в и р о в а т ь ее по методу Ф и ш е р а , помещая в среду рядом с кусочками опухоли кусочек мышцы (или какого-нибудь органа). Плазма крови получается следующим образом. Б е р е т с я кровь посредством промасленной канюли у ж и в о т н о г о (чаще всего у к у р и ц ы ) и з art. carotis и л и при помощи шприца (смазанного внутри вазелином) из сердца маленьких животных или из вены руки человека. Кровь набирается в парафинированные центрифужные пробирки (или под слой жидкого па­ рафина), стоящие на льду. Кровь центрифугируется в течение нескольких минут на электрической центри­ фуге (можно пользоваться я ручной). Прозрачная плазма, собравшаяся над осевшими эритроцитами и лейкоцитами, снимается и идет сейчас ж е д л я п р и ­ готовления к у л ь т у р и л и с о х р а н я е т с я в запасе во .льду. Е с л и работают с «гепариновой плазмой» (см. Гепарин), то м о ж н о обойтись без п а р а ф и н и р о в а н и я и охлаждения. Обыкновенно применяют плазму ж и ­ в о т н о г о т о г о ж е в и д а , что и к у л ь т и в и р у е м а я т к а н ь . Можно однако пользоваться и гетерологическими плазмами, успешно выращивать ткани аксолотля, на­ пример в плазме кролика (Кронтовский и Шустова, Хлопин), или ткани мыши—в плазме курицы (Фишер) л т. п. В общем плазма к у р и ц ы по заключению К а р ­ р е л я я в л я е т с я наилучшей средой д л я в ы р а щ и в а н и я т к а н е й ж и в о т н ы х р а з н ы х видов, в том числе и м л е ­ копитающих (включая и человека). Т. к. можно при­ менять и гетерологические эмбриональные экстракты «(Каррель), то д л я к у л ь т и в и р о в а н и я т к а н е й р а з н ы х ж и в о т н ы х и человека особенно часто пользуются •смесью п л а з м ы к у р и ц ы с к у р и н ы м э м б р и о н а л ь н ы м •соком. Н о в и д и м о м у п о с л е д н и й м о ж е т быть з а м е н е н р а с т в о р о м «протеоз» и л и п р о д у к т а м и (типа п е п т о н а Witte) непродолжительного пепсинного переварива-ния ф и б р и н а и л и ж е т к а н е й р а з н ы х о р г а н о в (см. н и ж е ) . Нередко в качестве среды пользуются и одной плаз­ мой, обыкновенно разведенной, раствором Тироде •или Р и н г е р - Л о к к а и л и ж е с п р и б а в л е н и е м т к а н е в ы х - э к с т р а к т о в и з к о с т н о г о МОзга ( М а к с и м о в ) , и з с е л е з е н ­ ки (Кронтовский), из опухолей (Drew), из д р о ж ж е й