* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

79 КУЛЬТУРЫ ТКАНЕЙ 80 затем снова производят пассаж и т. д. Мож­ но хорошо разросшуюся культуру разрезать на 2 части (рис. 4—1) и затем половину каж­ дого кусочка (рис. 4—2) можно эксплян- Р и с . 3. П а с с а ж н ы е т к а н е в ы е к у л ь т у р ы . тировать в виде отдельной культуры (рис. 4-—3); такие культуры обнаруживают обык­ новенно почти одинаковый рост (рисунок 4, кривые роста), в виду чего они являются очень точным биол. реагентом для изучения всевозможных воздействий, к-рым подвер­ гается одна из них (другая оставляется для контроля). Иногда удается вырезать часть новообразованной зоны и из нее получить дальнейший рост. Пассажи делают обычно каждые два-три дня; при работе с тканями холоднокровных, рас­ тущими при комнат­ ной темп. —значитель­ но реже, например ка­ ждые 2-—2 / недели. Пассажную тканевую культуру, к-рая росла в течение 24 ч. в тер­ мостате, можно потом на много дней (до 25 дней по опытам Мейечасы ра) оставить при ком­ Р и с . 4. Р о с т д в у х т к а ­ натной t° или на хо­ невых культур, при­ готовленных из одной лоду, а затем с успе­ культуры фиброблахом сделать пассаж. стов. Это обстоятельство дает возможность перевозить или пересылать ПО почте такие культуры на очень далекое расстояние. 5. И с с л е д о в а н и е тканевых к у л ь т у р , а) Н а б л ю д е н и е жи­ в ы х к у л ь т у р . Особо важное значение имеет микроскоп, исследование живых тка­ невых культур: кратковременный осмотр производится просто при комнатной t ° ; для длительного наблюдения за амебоидной по­ движностью,.делением клеток, ритмическим сокращением тканевых культур из сердца и т. п. эксплянтаты Ставят на согревательный столик, или микроскоп вместе с культурой помещается в специальном термостатном ящике. Важную услугу оказывает исследо­ вание при темнопольном освещении, т. к. при нем в живой клетке видны митохондрии (хондриосомы), заметно появление различ­ ных изменений в структуре цитоплазмы и ядра и т. д. [см. отд. табл. (т. X I V , ст. 375— 376), рисунки 6 и 7]. Д л я получения отчетли­ вых картин (при темнопольном освещении) необходимо специальным образом монтиро­ вать препарат или применять PreparierWechsel-Condensor&bi Петерфи (фирмы Цейс). Прекрасные картины получаются при помо­ щи методов прижизненного окрашивания. 1 2 Зарисовывание и микрофотографирование производятся в общем обычным образом. Для целей микрокинематографии, к-рая по­ зволяет проследить тончайшие детали дви­ жения нормальных и раковых клеток, их размножения и т. д., в последнее время предложена сравнительно простая аппара­ тура. Тканевые культуры особенно пригод­ ны и для различных микроопераций на клет­ ках, для микрургии (см.), т. к. при этом клетки во время операции находятся, так сказать, в более «физиол.» условиях, чем. при других методах, и после операции можно проследить клетку в условиях тканевых культур в течение долгого времени; для ре­ гистрации процесса микрооперации и по­ следствий ее особенно пригоден фотографич. окуляр (например «Phoku» Zeiss). Д л я про­ ведения микрургии (см.) в тканевых куль­ турах необходимы некоторые специальные приемы и приспособления, разработанные Петерфи, Кронтовским и др. б) Ф и к с и р о в а н и е и о к р а с к а т к а ­ н е в ы х к у л ь т у р д л я ц и т о л о г и ч е с ­ к и х и г и с т . ц е л е й . Д л я получения микроско­ пических (тотальных) препаратов из целых тканевых культур [к-рые д л я получения хороших препаратов д о л ж н ы быть заранее (при изготовлении тканевых культур) приготовлены достаточно тонкими, не содер­ жать толстого слоя плазмы и л и приготовлены в жид­ ких средах] Максимов рекомендует фиксацию куль­ тур в жидкости Корнуа (для тонких препаратов—жид­ кость Ценкера) и окраску гематоксилином Делафильда. К а р р е л ь и его у ч е н и к и п о л ь з у ю т с я обыкновенно фор­ малином. Фишер фиксирует тканевые культуры в 2 % - н о м ф о р м а л и н е (в Р и н г е р о в с к о м р а с т в о р е ) и л и в 2%-ном формалиновом алкоголе, окрашивает гема­ токсилином, промывает, а затем через спирт, ацетонк с и л о л , к с и л о л доводит до канадского бальзама. Д л я получения окрашенных срезов Максимов применяет фиксацию тканевых культур почти исключительно в Z e n k e r - F o r m o l & е (15—20 м и н . ) и б ы с т р о з а к л ю ч а е т в целлоидин. Леви для фиксации тканевых культур особенно рекомендует жидкость Максимова такого с о с т а в а : к 8 см о с н о в н о г о ( з а п а с н о г о ) р а с т в о р а Ц е н ­ к е р а п р и б а в и т ь 1 см ч и с т о г о ф о р м а л и н а и 1 ш & 2 % - н о й о с м и е в о й к - т ы . Ф и к с и р о в а т ь 2—6 м и н . П о с л е фиксации—заключение в целлоидин или целлоидинп а р а ф и н п о П е т е р ф и (в п а р а ф и н е н е б о л е е 15 м и н у т ) и окраска Гейденгайновским железным гематоксили­ ном. Н а основании тщательных исследований Стреидж у е й с а и К а н т и (см. н и ж е ) , п о с в я щ е н н ы х и з у ч е н и ю изменения живых клеток при фиксации, Нивен (Niven) предварительно подвергает тканевые куль­ туры действию 2%-ного раствора осмиевой кислоты, затем ф и к с и р у е т в ж и д к о с т и Ц е н к е р а (без у к с у с н о й к-ты) и о к р а ш и в а е т ж е л е з н ы м г е м а т о к с и л и н о м . Д л я специальных целей применяются соответствующие ме­ тоды фиксации и о к р а с к и . ъ 3 в) Б и о л . и ф и з и о л . методы. При исследовании жизнедеятельности тка­ невых культур и применении их для изуче­ ния различных вопросов биологии и меди­ цины особенно важное значение имеют к о ­ личественные методы. Жизнедея­ тельность тканевых культур можно изме­ рять различным образом: интенсивностью обмена веществ, скоростью роста, количе­ ством митозов и т. п. Так как увеличение массы ткани растущей культуры измерить непосредственно не удается (в виду труд­ ности взвешивания), то о ней судят по уве­ личению поверхности тканевой культуры,, причем скорость роста выражается обычно по методу Иблинга: зарисовывают (при по­ мощи проекционного рисовального аппара­ та) контуры только что эксплянтированного кусочка (рис. 4—2) и определяют при помощи планиметра поверхность (А ) после 48 ча­ сов роста (или вообще за время f), опять за­ рисовывают контуры всей разросшейся куль0