* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки
709 КРОВЬ 710 шивают; через несколько минут фильтруют и в опре д е л е н н о м о б ъ е м е (4 см ) прозрачного фильтрата оса ж д а ю т у г л е в о д ы д о б а в л е н и е м 1 см полунасыщенного раствора C u S 0 и 1 г гидроокиси кальция [Са(ОН) ]. Перемешав смесь, через у часа центрифугируют, при б а в л я ю т к 0 , 5 см центрифугата (охлаждая льдом} 3 см п р и б л и з и т . 8 5 % - н о г о р а с т в о р а х и м и ч е с к и ч и стой H S 0 ( 1 0 см в о д ы и к о н ц е н т р и р о в . с е р н о й к-ты д о 1 0 0 см ) и н а г р е в а ю т н а к и п я щ е й в о д я н о й б а н е р о в н о 4 м и н у т ы . П о о х л а ж д е н и и ( л ь д о м ) д о б а в л я ю т 0 , 1 см 0,125 % - н о г о р а с т в о р а в е р а т р о л а в чистом (не с о д е р ж а щ е м а л ь д е г и д а ) а л к о г о л е и ч е р е з 20 м и н . с р а в н и в а ю т окраску исследуемой жидкости в Аутеырита коло р и м е т р е ( с м . Аутенрита колориметр) с окраской кли на, п р о к а л и б р и р о в а н н о г о заранее но стандартным ра створам молочной кислоты. П р и этом методе в е с ь м а с у щ е с т в е н н о е з н а ч е н и е име ет ч и с т о т а и к о н ц е н т р а ц и я I I S 0 ; и с п ы т ы в а е т с я H S 0 с л е д у ю щ и м о б р а з о м : 3 см& H S 0 о х л а ж д а ю т л ь д о м и к н и м п р и б а в л я ю т 0,1 см р а с т в о р а в е р а т р о л а (см. вы ш е ) , причем в течение 5 мин. не д о л ж н о п о я в л я т ь с я желто-зеленого о к р а ш и в а н и я . Ф и р м а С. A . F . K a l i l b a u m (Berlin) доставляет специальную марку H S 0 «рго a n a l y s i a c i d i l a c t i c i » . Э т у к-ту л е г к о з а м е н и т ь о б ы ч но!! п р о д а ж н о й химически чистой кислотой, перегнав ее и р а з в е д я в о д о й п о п р и в е д е н н о й в ы ш е п р о п и с и . Ч и с т у ю с е р н у ю к-ту н у ж н о х р а н и т ь в с к л я н к е с х о р о ш о притертой стеклянной п р о б к о й и оберегать от п о п а дания пыли. 2. П о Ф р и д е м а ц у (Friedemann), К о т о н и о (Cotonio) и III а ф ф е р у (Schaffer). П р и н ц и п м е т о д а. В о с в о б о ж д е н н о м о т б е л к о в и у г л е в о д о в ф и л ь т р а т е К . м о л о ч н а я к-та о к и с л я е т с я р а с т в о р о м п е р м а н ганата ( К М п 0 ) в присутствии сернокислого марган ца до ацетальдегида, который отгоняется (при просасывании тока воздуха) через обратный холодильник в 1 %-ный р а с т в о р бисульфита, избыток к-рого окисляет ся иодом. Соединение альдегида с бисульфитом разла гается содой, после чего количество освободившегося бисульфита определяется иодометрическим титровани ем. 2 грамм-атома иода соответствуют одной граммм о л е к у л е м о л о ч н о й к - т ы . — Р е а к т и в ы : 1) п р и б л и зительно /ю раствор КМп0 (перед употреблени ем р а з б а в л я е т с я в 20 р а з водой); 2) р а с т в о р с е р н о к и с лого марганца: H S 0 2 8 5 см , M n S 0 — 1 0 0 г, д е с т и л . в о д ы д о 1.000 см ; 3) 1 % - н ы й р а с т в о р бисульфита н а т р и я ( N a H S 0 ) ; 4) / , р а с т в о р и о д а ; 5) / . ра створ иода; 6) д в у у г л е к и с л ы й н а т р и й в порошке ( N a H C 0 ) ; 7) 1 %-ный р а с т в о р к р а х м а л а в н а с ы щ е н н о м р а с т в о р е N a C l . В о с в о б о ж д е н н о м от б е л к о в ф и л ь т р а т е К . ( F ^ , с о о т в е т с т в у ю щ е м 2 см К . , у г л е в о д ы о с а ж д а ю т п р и б а в л е н и е м 2 см 8 % - н о г о р а с т в о р а C u S 0 и 1 г г и д рата окиси кальция, перемешивают и через / — 1 час фильтруют. Опред. часть фильтрата ( F ) помещают в к о л б у А п е р е г о н н о г о а п п а р а т а [ р и с . 17(ст. 6 7 5 — 6 7 6 ) ] , п р и б а в л я ю т 10 см р а с т в о р а M n S 0 (2), доводят водой д о 6 0 — 7 5 см , добавляют талька для равномерного к и п е н и я и с о е д и н я ю т к о л б у с х о л о д и л ь н и к о м В. Де лительную воронку С наполняют Д <> раствором К М п 0 ( 1 ) . Н а л и в в п р и е м н и к D 6 см р а с т в о р а б и с у л ь ф и т а ( 3 ) и 1 0 — 1 5 см в о д ы , с о е д и н я ю т в с е ч а с т и п р и б о ра, пускают водоструйный н а с о с и начинают нагре в а н и е с о д е р ж и м о г о к о л б ы А. К о г д а ж и д к о с т ь н а ч н е т кипеть, по каплям п у с к а ю т из делительной в о р о н к и раствор K M n O j до начала выпадения осадка перекиси марганца. З а к о н ч и в перегонку ацетальдегида, разъ е д и н я ю т к о л о н к у с б у с а м и Е и п р и е м н и к D, д а ю т ж и д к о с т и из к о л о н к и стечь в п р и е м н и к , ополаскивают бусинки водой и приступают к титрованию. Приба вив к с о д е р ж и м о м у п р и е м н и к а н е с к о л ь к о к а п е л ы ш д и к а т о р а (7), титруют сначала / , затем / раство р о м и о д а до с л а б о г о л у б о г о о к р а ш и в а н и я ; добавля ют теперь 0,3—0,5 г N a H C 0 и оттитровывают осво бодившийся бисульфит / раствором иода (число см& р а с т в о р а , п о т р а ч е н н о г о п р и п о с л е д н е м титрова н и и , = а). О п и с а н н ы м с п о с о б о м т и т р у ю т т а к ж е к о н т рольную жидкость, полученную перегонкой одних ре активов без фильтрата К . (число потраченных при втором титровании см ^/юо р а с т в о р а и о д а = о ) . — Р а с ч е т ; с о д е р ж а н и е м о л о ч н о й к-ты в мг в о в з я т о й для окисления п о р ц и и фильтрата ( F ) р а в н о : (а—Ь). . п . 4 5 мг, г д е п—нормальность р а с т в о р а и о д а , 45 мг— к о л и ч е с т в о м о л о ч н о й к и с л о т ы , с о о т в е т с т в у ю щ е е 1 см нормального раствора иода при титровании. 3 3 4 3 2 3 3 3 2 4 3 3 2 4 2 4 2 4 3 2 4 4 п 4 3 2 4 4 3 п п 3 0 1 0 3 3 3 4 1 Л 2 3 4 3 П 0 3 4 3 п п 1 0 1 0 0 3 п 1 0 0 3 2 3 Гиманса ван-ден Берга (Hymans v . d. Bergh) и до 1 мг% по данным Форстера (Forster). Концентрацию билирубина часто выражают в билирубиновых единицах; билирубиновой единиц& й условно называют концентрацию билирубина, соотвезтетвующую 0,5 мг его в 100 ем растворите ля. Сыворотка новорож денных содержит билирубина больше: от 1 до 3 мг%. Предельная концентрация били рубина в крови, выше к-рой наступает билирубинурия, равна примерно 2 мг%. Увели чение наблюдается при застойной и гемоли тической желтухе, пернициозной анемии, б-ни Банти, слабости сердечной мышцы. П о нижено содержание при заболеваниях по чек, раковой кахексии, t b c (см. также Билирубинемия). 3 О п р е д е л е н и е по Гиманс ван-ден Бергу. Р е а к т и в ы . 1)Диазореактив№ 1:5,0сульфаниловой к-ты р а с т в о р я ю т в 5 0 0 см в о д ы , п р и л и в а ю т 50 см Н С 1 ( у д . в . 1 , 1 9 ) и д о в о д я т в о д о й д о 1 л. 2 ) Д и а з о р е а к тив № 2 : 0,5 % - н ы й р а с т в о р а з о т и с т о к и с л о г о н а т р и я . 3) 1 0 % - н ы й р а с т в о р K C N S . 4) 0 , 1 5 0 8 г х и м и ч е с к и ч и с тых ж е л е з о а м м и а ч н ы х квасцов растворяют прибли з и т е л ь н о в 2 5 "см* в о д ы , п р и б а в л я ю т 5 0 см концентри р о в а н н о й Н С 1 и д о в о д я т в о д о й д о 1 0 0 см . К 10 см" п о л у ч е н н о г о р а с т в о р а п р и б а в л я ю т 2 , 5 см концентри р о в а н н о й Н С 1 и д о в о д я т в о д о й д о 2 5 0 см . 5) С т а н д а р т ный р а с т в о р : в делительную в о р о н к у вводят 3 см р а с т в о р а ( 4 ) , 3 см р а с т в о р а ( 3 ) и 1 2 см э ф и р а ; с м е с ь тщательно взбалтывают в о х л а ж д е н н о й в о р о н к е и, дав о т с т о я т ь с я , о с т о р о ж н о с п у с к а ю т водный р а с т в о р через к р а н в о р о н к и . Цвет эфирного раствора рода нистого железа соответствует о к р а с к е р а с т в о р а , со д е р ж а щ е г о 0 , 5 мг б и л и р у б и н а в 1 0 0 см . В м е с т о р а с т в о р а к в а с ц о в (4) м о ж н о п о л ь з о в а т ь с я т а к ж е р а с т в о р о м а з о т н о к и с л о г о к о б а л ь т а ( 2 % ) . О д н а к о эти с т а н д а р т н ы е р а с т в о р ы дают оттенки, отличные от п о л у ч а е м о г о в к р о в и п р и действии д и а з о р е а к т и в а . Л у ч ш е поэтому пользоваться для с р а в н е н и я чистым б и л и р у б и н о м . — Х о д о п р е д е л е н и я . В центрифужную пробирку в в о д я т 1 см& п р о з р а ч н о й с ы в о р о т к и б е з с л е д о в г е м о л и з а , п р и б а в л я ю т 2 см& 9 6 % - н о г о с п и р т а и ц е н т р и ф у г и р у ю т . В с о с у д к о л о р и м е т р а б е р у т 1 с,н п р о з р а ч н о г о ц е н т р и ф у г а т а , п р и л и в а ю т 0 , 2 5 см свежеприготовленной с м е с и и з 10 см* р а с т в о р а ( 1 ) и 0 , 2 см р а с т в о р а ( 2 ) , 0 , 5 см спирта и колориметрируют. Д л я вычисления коли ч е с т в а б и л и р у б и н а в 1 0 0 см сыворотки пользуются 2,5 Н о 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 в 3 3 3 3 формулой: мг; Н — о т с ч е т стандарта, 2 Н,—от- Hi счет о п ы т а . — О п р е д е л е н и е п о Г е р ц ф е л ь д у . Б е р у т с е р и ю п р о б и р о к . В п е р в у ю в в о д я т 2 см сыворотки, в о с т а л ь н ы е п о 1 см* в о д ы ; и з п е р в о й в о в т о р у ю п е р е н о с я т 1 см ж и д к о с т и и с м е ш и в а ю т ; из нее п е р е н о с я т 1 см ж и д к о с т и в т р е т ь ю и т. д . К о в с е м п р о б и р к а м прибавляют по несколько капель реактива Гаммарстен а ( с м . Желчь). Получается зеленое окрашивание. Концентрация билирубина в последней, содержащей еще о к р а ш е н н у ю жидкость пробирке соответствует 0 , 0 1 5 6 мг в 1 см .—П р и м е р: о к р а с к а еще заметна в п р о б и р к е , где с ы в о р о т к а б ы л а р а з в е д е н а в 4 р а з а . Концентрация билирубина в 1 0 0 см* сыворотки= = 0,0156 х 4 х 100=6,24.мг. П р и этом методе п о л у ч а ю т ся однако слишком высокие числа. 3 3 3 3 Помимо указанных методов количествен ного определения различных экстрактивных веществ К. предложены также и другие. Пигменты. Б и л и р у б и н (см. Желчь) принадлежит к нормальным составным ча стям К. человека и животных. Содержание билирубина в К. данного субъекта в норме очень постоянно, но индивидуально различ но: от 0,25 мг% до 0,40 м&г% по данным 1 Гемоглобин нормально в плазме не обнаруживается/ переходит в нее при ин токсикациях, ведущих к интравазальному гемолизу (мышьяковистый водород, нитро бензол, анилин, бертолетова соль, пирогал лол). Только значительное првышение содер жания НЬ в сыворотке ведет к гемоглобинурии, т . к . малые количества удерживаются в крови. — Г е м а т о п о р ф и р и ы обнару живайся в К. при пернициозн. анемии, ост рой анемии, острой желтой атрофии печени, эклямпсии, малярии, свинцовом отравлении; в норме же он отсутствует (см. также Порфи~ pun).—Следы метгемоглобина нахо дили при отравлении амилнитритом и бер толетовой солью, анилином, нитробензолом, пирогаллолом. — У р о б и л и н . Применяя реактив Шлезингера (см. Моча), часть иссле дователей находила уробилин в нормаль23