* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

256 ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА 256 но тому, что M e t h y l g r i i n - P y r o n i n в ней ни­ чего не окрашивает. Однако ни одна струк­ тура не исчезла, следовательно остались ос­ новные (т. е. оксифильные) белки; их уже Унна не идентифицирует ни с какими опре­ деленными хим. понятиями и называет ус­ ловными терминами. Для основного белка протоплазмы он употребляет термин «спонгиоплазма» (она красится только кислыми красками); в ядре он различает два этажа: верхний—мезопластин— окрашивается ге­ матоксилин-квасцами (кислая к р а с к а + п р о ­ трава) и удаляется только 15%-ной соляной к-той; нижний—пластин (основная субстан­ ция)—красится только кислыми красками. В связи с этим очень существенны предста­ вления Унна о кислород-образующих и кислород-потребляющих местах в клетке. Для определения этих мест свежие срезы з а ­ мороженных тканей обрабатываются реак­ тивом на кислород—Rongalitweiss, к-рый при избытке кислорода дает посинение. R o n ­ galitweiss является метиленовой синькой, к-рая восстановлена ронгалитом (продукт конденсации формальдегида с натриевой солью сульфоксиловой кислоты). П р и из­ бытке 0 метиленовая синь восстанавли­ вается. Оказалось, что все кислые места с о ­ впадают с местами, содержащими кислород ( т . е . окрашиваются этим реактивом в синий цвет), но среди них особо выделяется х р о ­ матин, к-рый воспринимает из лимфы кисло­ род и активирует его при посредстве содер­ жащегося в нем железа ( 0 = 0 переводится в ф о р м у — О — О — ) . Активированный кисло­ род при посредстве пероксидазы хроматина (она открывается бензидиновой пробой) пе­ редается в окружающие места. Другие кис­ лые места, окрашиваемые Rongalitweiss: граноплазма, глобулин ядрышка, х р я щ и др.-— только накапливают получаемый от хрома­ тина кислород, сами же они его активиро­ вать не могут. В о всех остальных местах (мышечные волокна, нервные отростки,спонгиоплазма, ороговевшие клетки и т. д.) кис­ лород поглощается химически. Эти т. н. ме­ ста редукции открываются на препаратах с помощью К М п 0 , к-рый является окисли­ телем. Отдавая кислород, он разлагается с образованием нерастворимых окислов мар­ ганца темного цвета, которые отлагаются в местах своего образования. 2 4 М е т о д и к о й р а с т в о р е н и я пользо­ вались многие авторы—Цахариас, Шварц, Мейер, Пратье и др. (Zacharias, Schwartz, Meyer, P r a t j e ) . Они дали описание процес­ сов растворения ядра, но, в отличие от Унна, названные авторы опирались только на мор­ фологию структур, однако окраски не рас­ сматривали как химич. реакции и употреб­ ляли их только для того, чтобы яснее ви­ деть происшедшие изменения. Главным не­ достатком этой методики с точки зрения ее хим. оценки является то, что в большинстве случаев наблюдаются процессы набухания и лишь редко происходит настоящее рас­ творение. Набухание как таковое зависит далеко не только от хим. строения вещества, и поэтому набухаемость даже очень различ­ ных веществ моягет оказаться вполне одина­ ковой. В отношении ядра почти единственно ценным гистохим. выводом является уста­ новление того, что ядрышко построено пре­ имущественно из глобулинов. И з всех ве­ ществ наибольшее внимание было уделено н у к л е о п р о т е и д у , так как его откры­ тие имеет очень большое значение для мно­ гих цитологических вопросов. К открытию нуклеопротеида (его идентифицировали с понятием хроматин) подходили различно: 1) Ц а х а р и а с и Шварц (1899—1901) дали таб­ лицы специфических по их мнению раство­ рителей, гл. обр. щелочей; 2) позднее приме­ нили растворение ферментами, использовав свойство нуклеопротеида перевариваться в трипсине и не изменяться в пепсине ;ван-Герверден (1910) предложила пользоваться нуклеазой как наиболее специфическим раство­ рителем однако этот метод распространения не получил, т. к. до сих пор не удалось вы­ делить этот фермент в достаточно чистом ви­ де; 3) Унна (1912—21) открывает нуклеоиротеид с помощью хромолиза, т. е. на осно­ вании окраски его метиловой зеленью до и после различных растворителей, при этом он исходит из электрополярных свойств этой краски и чувствительности ее к редукции; 4) наконец недавно Фельгеном (Feulgen; 1924) предлоя{ена прекрасная гистохимиче­ ская реакция на нуклеиновую кислоту, так называемая нуклеальная реакция. В виду того,что нуклеиновая кислота не встречает­ ся в свободном состоянии, а только лишь в соединении с белками, то, открывая ее, этим самым открывают нуклеопротеид. Ре­ акция основана на свойстве тимо-нуклеиновых кислот после умеренного кислого гидро­ лиза отщеплять пуриновые основания и ос­ вобождать альдегидные связи, в результате чего получается тиминовая кислота. Если воздействовать на нее фуксино-сернистой кислотой (бесцветное соединение), то в р е ­ зультате ее присоединения по месту альде­ гидных групп получится новое соединение темнолилового цвета. Можно считать уже установленным, что нигде кроме как в ядер­ ном хроматине нуклеиновая кислота не со­ держится. Гистохимич. реакций на белок очень мало, и все они по существу являются реакциями на аминокислоты. Такими реак­ циями являются: реакция Миллона (откры­ вает тирозин), диазореакция Эрлиха (тиро­ зин и гистидин), реакция Ромье ( R o m i e u ) (триптофан) и ксантопротеиновая реакция (триптофан и тирозин). Особняком стоит нингидриновая проба, указывающая вооб­ ще на свободные аминогруппы (аминокисло­ ты в а-положении) и введенная в гисто­ химию Бергом. Полоиштельный результат реакции указывает на процессы разрушения белка в тканях. Так, Бергом описан очень интересный процесс разрушения белка в мышцах голодающих саламандр. Жиры в свободном состоянии открываются сравнительно легко; все же жироподобные субстанции, с в я з а н н ы е с б е л к о м , наблюдению недоступны. Луч­ шим методом обнаружения жиров является окраска нейтр.азокрасками: Sudan I I I , Scharlach R, растворенные до 4 0 — 5 0 % в спирте. Окраска объясняется чисто физически—эк­ стракцией краски жирами, так как коеф. растворимости ее в мшрах во много раз боль­ ше, чем в спирте (распределительный коефи-