* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

243 ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА 244 хитин размягчается диафанолом (двуокись хлора, растворенная в уксусной к-те) или кедровым маслом. Простейшим методом при­ готовления срезов является разрезание ку­ сочков от руки обычной бритвой для бритья. Этот метод очень широко применяется в бо­ танике и до сих п о р . Н а ботанических объ­ ектах такое изготовление срезов без даль­ нейшей обработки (и даже без фиксадии) возможно потому, что растительные ткани относительно очень плотны; в случае ж и ­ вотных объектов этот метод применяется крайне редко. Н а первых порах развития техники срезов применяли разрезание в пе­ чени, при чем кусочек зажимался между 2 пластинками свежей печени, и разрез про­ водился через всю массу. В наст, время для приготовления срезов пользуются микро­ томами (см.), позволяющими делать очень тонкие срезы и регулировать их толщину. Наиболее простой способ — р е з к а з а м о ­ р о ж е н н ы х к у с о ч к о в . Кусочек ткани, фиксированный в формоле или других фикса­ торах, замораживается (эфиром или жидкой углекислотой) и т. о. примерзает к столику специального микротома. Промерзшие тка­ ни настолько тверды, что позволяют микро­ томной бритве разрезать их на очень тонкие срезы (до 5 ft). Срезы тотчас же переносятся в воду, где они оттаивают. Недостатки это­ го метода; 1) срезы нек-рых тканей крошат­ ся и по оттаивании распадаются; 2) нельзя работать с очень мелкими объектами; 3) поч­ ти невозможно приготовить большую се­ рию срезов, т. к. часть их всегда гибнет.— Гораздо более распространена резка ку­ сочков тканей, з а к л ю ч е н н ы х в п а р а ­ ф и н или в ц е л л о и д и н . П р и заключении в эти вещества кусочек должен быть предва­ рительно пропитан жидкостью, которая, с одной стороны, смешивалась бы с водой, а с другой—растворяла бы парафин и целлои­ дин. В случае парафина для этого служат различные углеводороды и их производные: бензол, ксилол, толуол, хлороформ и др., а также различные масла. Обычно кусочек пе­ реносят сначала в 50 %-ный спирт, затем в 70 96 100%-ный; далее следуют смеси 100%-ного спирта с возрастающими коли­ чествами ксилола, затем чистый ксилол-•>ксилол, насыщенный парафином (при 37°), и наконец чистый парафин (при 60°), кото­ рый сменяют обычно 3—4 раза. Парафиновая залйвка производится в термостате. Ко­ гда кусочек окончательно пропитался, его быстро охлаждают, так как при медленном застывании парафин кристаллизуется. Д о введения во всеобщее пользование парафина применялось заключение кусочков в мыло. П р и заливке в целлоидин объект совершен­ но так же проводят через спирты возрастаю­ щей крепости, затем переносят в смесь спир­ та с эфиром (аа) и наконец пропитывают спирто-эфирными растворами целлоидина восходящей крепости до концентрации 8 % . Затем его вынимают, кладут на кусочек де­ рева или эбонита и переносят в сосуд с па­ рами хлороформа; при этом целлоидин за­ твердевает. Далее прикрепленный к дере­ вяшке и залитый в целлоидин кусочек по­ гружают в 70 %-ный спирт, где он достигает плотности мягкого х р я щ а . Залитый кусочек называется б л о к о м . В этом сострянии объекты можно сохранять бесконечно долго без всякого.вреда для структур. Обе эти за­ ливки требуют много времени, т. к. в боль­ шинстве сред кусочек должен лежать сут­ ки и больше. С помощью микротома удает­ ся разложить любой кусочек на срезы от 1,« до 20 /л, не потеряв при этом ни одного. И з парафиновых блоков можно легко полу­ чать ленточки из срезов, благодаря тому, что они при резке своими краями приклеи­ ваются друг к другу. Срезы переносят на слабо подогретую воду, на которой они лег­ ко расправляются (они не должны распла­ вляться). После этого срезы помещают на предметные или покровные стекла и просу­ шивают при 37°, при чем они плотно при­ стают к стеклу. Перед окрашиванием пара­ фин должен быть удален, для чего предмет­ ные стекла с приклеенными срезами погру­ жают в ксилол (или др. вещество), в к-ром парафин растворяется; затем ксилол отмы­ вают в 100%-ном спирте, и через спирты ни­ сходящей крепости срезы доводятся до воды (если предполагают красить водной крас­ кой). В случае целлоидиновой заливки при­ готовленные срезы поступают в 70 %-ный спирт и затем в воду; красят их в чашечках. Сам целлоидин в большинстве случаев окрас­ ке не мешает, а в случае нужды он легко может быть удален спиртом с эфиром. О к р а с к а . Ее целью является отчетли­ вое выделение различных структур. Исход окраски сильно зависит от предшествовав­ шей фиксации. Лучшая окрашиваемость до­ стигается поеле спирта, формола, затем с у ­ лемы и трихлоруксусной кислоты, после же солей осмия, лучшего из известных фикса­ торов, окраска нередко затруднена. Однако можно значительно облегчить окраску, об­ работав срез перекисью водорода, удалив так. обр. весь связанный тканью осмий, или продержав срезы в сулеме. Для удачной окраски обычно необходимо полное удале­ ние всех следов фиксатора. Важным факто­ ром окраски является также обработка тка­ ни спиртом (для удаления ж и р о в ) ; при па­ рафиновой и целлоидиновой заливках это достигается в процессе заливки, при резке же на замораживающем микротоме перед окраской очень рекомендуется положить срезы на не к-рое время в алкоголь. При окрашивании имеет первенствующее значе­ ние химич. строение краски, а также и ме­ тод ее применения. Не всякое окрашенное соединение есть краска, но если хромофор­ ные группы в нем имеются (см. Анилин, ани­ линовые краски), то наибольшее значение имеет заряд, другими словами—реакция краски (основная или кислая); этим опре­ деляется также и метод ее применения. Н е ­ которые краски окрашивают субстрат непо­ средственно. Другие краски неспособны к непосредственному действию и требуют пред­ варительного протравления субстрата ве­ ществом, чаще всего неокрашенным, к-рое с одной стороны вступает в связь с субстра­ том, а с другой—собственно с краской. Т. о. получаются цветные лаки. П р и этом неред­ ко сильно изменяется и цвет самой краски. В качестве протрав применяют различные соли алюминия, хрома, железа и д р . ; чаше