* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

247 15 5 2 МИХАЭЛИСА КОНСТАНТА весь фермент Е находится в виде комплекса v 24S ES, (4) = 2 Л = const = F k Е а-М. мало и з у ч е н . р-М. имеет т. к и п . 1687760 мм, 65,5720 мм; rf & 0,7966; n ° 1,4650; Я 224,5 ммк. Д л я количественного определения р-М. в смеси с д р у г и м и у г л е в о д о р о д а м и , н е содержащими с о п р я ж е н н о й сис­ темы двойных связей, используют реакцию его с ма­ леиновым ангидридом. М. (гл. о б р . Р-форма) с при­ месью небольшого количества а-формы встречается в составе м н о г и х эфирных масел, н а п р , в байевом масле (Pimenta acris), в масле багульника (Ledum palustre), в масле плодов амурского и японского бар­ хатного дерева и д р . М. содержится в скипидаре из сосны обыкновенной и в скипидарах и з д р у г и х хвой­ н ы х . Р"М. получают дегидратацией линалоола; осо­ бенно удобна термич. изомеризация Р-пинена. Р-М. применяют д л я синтеза душистых веществ и гидро­ перекисей И д р . Я . И. Бардышев. М И Х А Э Л И С А К О Н С Т А Н Т А х а р а к т е р и з у е т зави­ симость скорости ферментативной реакции от кон­ ц е н т р а ц и и субстрата в стационарном состоянии про­ цесса; численно равна концентрации субстрата, п р и к-рой скорость реакции составляет половину макси­ мально в о з м о ж н о й . Использование М. к. в качестве величины, х а р а к т е р и з у ю щ е й ферментативные реак­ ции, б а з и р у е т с я на представлении, впервые выдви­ нутом Б р а у н о м в 1902 и получившем окончательное обоснование в работах Михаэлиса и Ментен в 1913, согласно к-рому во всяком ферментативном процессе первым этапом является обратимая реакция м е ж д у ферментом (Е) и субстратом (S) с образованием ком­ плекса (ES), к-рый в ходе п о с л е д у ю щ и х превращений дает продукты ферментативной реакции (-5") с реге­ н е р а ц и е й и с х о д н о г о фермента. Реакции эти характе­ р и з у ю т с я соответствующими константами скорости D м а к с M a K C < Иначе говоря, п р и значительном избытке субстрата наблюдается максимальная скорость ферментативной реакции, н е зависящая от концентрации с у б с т р а т а . П р и малых концентрациях [S], когда [S] <^.К М1 k [Е ] 2 0 v= - К. т. е. скорость реакции находится в линейной з а в и с и ­ мости от концентрации субстрата. В действительности очень большое количество ферментативных реакций подчиняется этим соотношениям. Из ур-ний (3) и (4) следует: макс. 1 J (5) м Е с л и п о л о ж и т ь v = 0,5 F , то К — [S], откуда следует, что М. к. численно равна концентрации с у б ­ страта, п р и к-рой скорость ферментативной реакции составляет половину максимальной. Бриггс и Х о л д е н показали, что вывод М и х а э л и с а и Ментен справедлив п р и д о п у щ е н и и , что константа скорости реакции I I k существенно меньше констан­ ты k что не всегда оправдывается. Бриггс и Х о л д е н вывели ур-ние зависимости скорости ферментативной реакции от концентрации субстрата д л я общего с л у ­ чая любых значений k , и k . Они п о к а з а л и , что в у с л о в и я х стационарного с о с т о я н и я системы M a K C 2 lt l 2 г „ C ? 1 . J _ l ° k l . fc^ fe:[E ][S] +fta+ fr, [ S ] 0 ^1» & — ^2* Е с л и обозначить Е + S iz± ES - Л S --Е h-i I II + k — К, fe K[E„] 2 т о скорость [S] [S] реакции выразится: i+K (6) Очевидно, что константа р а в н о в е с и я реакции I вы­ разится соотношением [ES] K v = k Ур-ние (6) аналогично у р - н и ю (2), но в н е г о , вместо константы равновесия АГ , входит константа К, у ч и ­ тывающая скорости в с е х реакций. Е с л и й < ^ й _ то р 2 1( Величина К может быть найдена и з измерений зави­ симости скорости реакции от концентрации субстра­ та. Е с л и н а ч а л ь н а я концентрация фермента (точнее, активных центров фермента) равна [Е ], т о IE] = [E ] — [ES]; тогда р 0 0 , т . e . t f = t f = l / t f . T . o 6 p . , у р - н и я (2) и (3) К являются частными случаями у р - н и я (6). Аналогично ур-нию (4), к [ Я ] = К ; тогда 0 M г 0 м а к с > V макс. К [S] L J Р ([E ]-[ES])[S] 0 (1) Обозначая К=1/К , м 0 0 i+K [S] П р и н и м а е т с я , что [S] ^ [S ], т. к. обычно [»У ]^>[# ]. И з у р - н и я (1) 0 получим: V = -r=r К п [Е ] [S] 0 (7) [ES] Скорость (v) реакции, измеряемая п о образованию продуктов реакции S& (реакция I I ) , выразится соот­ ношением v = k [ES], и , следовательно, 2 *,-К [Е] [S] р v = (2) М и х а э л и с и Ментен в своем выводе использовали не в е л и ч и н у .йГр, а обратную ей величину — константу д и с с о ц и а ц и и комплекса ES на Е и S; т. о . , константа М и х а э л и с а , К =1/К^. Е с л и в ур-нии (2) заменить K на К , то м v м r _h 2 [Eg] [ S ] п А н а л и з этого у р - н и я показывает, что п р и значитель­ н о м избытке субстрата, т. е. п р и [.9]^>.йГ , когда рав­ н о в е с и е в реакции I сдвинуто вправо и практически м Ур-ние (7) вполне аналогично ур-нию (5), причем константа К может быть названа М, к., и с п р а в л е н н о й по Б р и г г с у и Х о л д е н у . Она действительна д л я &/У стационарного состояния ферментативного процес­ са, в котором один актив­ ный центр фермента реа­ гирует с одной молекулой субстрата, д а в а я активиро­ ванный комплекс, распа­ &/И д а ю щ и й с я с образованием продуктов реакции и р е ­ -&/к генерацией фермента. Д л я определения величины М. к. исследуют зави­ симость скорости энзиматич. реакции от концентрации субстрата, б е р я широкий р я д [S], и выражают э т у зависимость графически, откладывая по о с и абсцисс м м