* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

ПчеЛы меДоНосНой геНом ментам * 51- and 31- short interspersed elements markers or 51- and 31-SINE m. – маркеры, используемые для анализа генома млекопитающих так же, как и RAPD маркеры, т. е. для выявления полиморфных районов по всему геному, а не в конкретном, заранее выделенном в нем районе. Это связано с тем, что SINE элементы, как и Alu-повторы, часто ассоциированы с микросателлитной ДНК или др. мотивами, обладающими полиморфизмом по длине. Поэтому использование двух праймеров – к 51(31) концу SINE и уникального, но произвольного праймера в 31(51) направлении от SINE – приведет к получению полиморфного по длине продукта. При этом нуклеотидные замены, приводящие к возникновению или исчезновению сайтов посадки праймеров, создают полиморфизм, для которого не существует «нулевых» аллелей. Пцр правила * ПЛр правілы * PCR rules – правила, которым необходимо строго следовать при работе с использованием ПЦР метода. Эта необходимость продиктована высокой чувствительностью метода и требованием чистоты эксперимента, т. е. не допускать загрязнения образцов, которое приведет к получению ложных результатов. 1. Работа, предшествующая ПЦР (выделение образцов ДНК, приготовление реакционной смеси), и работа, включающая проведение ПЦР, а также анализ ее продуктов, должны осуществляться в раздельных помещениях. 2. Рекомендуется использовать ламинар-боксы, оборудованные источниками УФ-света. 3. Необходимо использовать новые одноразовые перчатки на каждой стадии подготовки и проведения ПЦР. 4. Необходимо использовать специально сконструированные для ПЦР дозаторы и наконечники с аэрозольными фильтрами. 5. Реагенты для ПЦР должны готовиться раздельно и использоваться исключительно для этой цели. 6. Растворы должны быть разделены на минимальные аликвоты и храниться отдельно от образцов ДНК. 7. Необходимо всегда ставить отрицательную контрольную реакцию, в которую входят все компоненты реакционной смеси и анализируе- 673 мой пробы, кроме исследуемой ДНК. Кроме того, необходимо соблюдать общую культуру работы в лаборатории, которая подразумевает проведение процедур, обеспечивающих стерильные и чистые условия (использование одноразовой посуды, регулярная влажная уборка помещений, регулярная обработка рабочего места и т. д.). Очень важно хранить реактивы не целиком, а небольшими порциями (аликвотами), поскольку при обнаружении загрязнения приходится уничтожать все реактивы. Загрязнение может произойти в результате случайного внесения в образец посторонней последовательности-мишени. Это может случиться на любом этапе: при получении образца, выделении ДНК, на стадии амплификации. Поскольку при ПЦР происходит экспоненциальное увеличение числа копий последовательности-мишени, то ложноположительный результат может получиться при минимальном количестве посторонней ДНК, вплоть до одной молекулы. Поэтому при работе необходимо соблюдать такие же строгие меры предосторожности, как и те, что используются в микробиологии. Загрязнения можно разделить на случайные и повсеместные. Во втором случае положительный сигнал дает как большинство анализируемых образцов, так и отрицательный контроль. Этот тип загрязнений легко выявляется с помощью системы контролей. Случайные загрязнения гораздо сложнее выявить, поскольку загрязненными оказываются отдельные образцы ДНК или пробирки для ПЦР. Ложноположительный результат возникает непредсказуемым образом и распознается с большим трудом. Пцр-технология * ПЛр-тэхналогія * PCR technology – серия методов для амплификации (размножения) специфических сегментов ДНК и одновременно для модификации амплифицируемых последовательностей, напр., для введения мутаций при ПЦР-мутагенезе и др. (см. Полимеразная цепная реакция). Пчелы медоносной геном * пчалы меданоснай геном * Honey bee genome – геном медоносной пчелы Apis mellifera включает в себя приблизительно около 300 млн п. о.