
* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки
672 ПУромициН знания нуклеотидной последовательности при дизайне праймеров. Амплифицируются как структурные, так и некодирующие участки генома, однако получаемый спектр ампликонов имеет определенные ограничения, связанные с условиями амплификации. Так, в частности, недоступными для анализа являются фрагменты слишком большой длины (больше 2,5–3 кб). Маркеры ISSR-ПЦР к настоящему времени получили широкое распространение для решения проблем оценки генетических связей между генофондами (в основном растений), чему способствовали такие свойства метода, как относительно высокая точность и воспроизводимость, доминантный тип наследования, высокий уровень полиморфизма. Пцр-гибридизация in situ * ПЛр-гібрыдызацыя in situ * PCR in situ hybridization or PCR PRINS – вариант ПЦР, т. е. полимеразной цепной реакции (см.), когда ДНК амплифицируется и выявляется на морфологически интактных клетках или тканях. Для этого клетки или ткань фиксируются, закрепляются на предметном стекле для микроскопирования и обрабатываются протеазой (см.). Затем добавляются все необходимые для ПЦР реагенты, стекло помещается прямо на термоблок амплификатора, добавляется Taq-полимераза (см.) и слайд покрывается минеральным маслом. Амплифицированный продукт может быть выявлен гибридизацией in situ (см.) или прямым инкорпорированием (включением) в продукт ПЦР нуклеотидов, меченных биотином (см.) или дигоксигенином (см. Дигоксигенином мечение). При этом методе в качестве праймеров (см.) используют множественные перекрывающиеся праймеры или конкатамеры (см.). Пцр-кариотипирование * ПЛр-карыятыпаванне * PCR karyotyping – метод идентификации отдельных хромосом с использованием ПЦР (см. Полимеразная цепная реакция) со специфическими праймерами (см.), напр., с последовательностями Alu-семейства альфоидной ДНК и др. 51- и 31-Пцр маркеры по коротким интерсперсным элементам * 51- и 31-ПЛр маркёры па кароткім інтэрсперсным эле- Пуромицин * пураміцын * puromycin – антибиотик (см.), который вследствие сходства по химической структуре с аминоацил-тРНК соединяется с С-концом и инкорпорируется в растущую полипептидную цепь в процессе трансляции (см.), вызывая ее преждевременную терминацию, что приводит к выходу из рибосомы (см.) неполных полипептидных цепочек. Освобожденный белок пептидилпуромицин, как правило, не активен, поэтому П. обладает бактерицидным действием. Пуфы * пуфы * puffs – широкие зоны (вздутия) гигантских, политенных хромосом (см.), которые чередуются с сужениями. Образуются в результате деспирализации и содержат открытые, активно транскрибируемые участки ДНК. Как правило, размер П. прямо коррелирует со скоростью его транскрипции. Число П. на видовом уровне стабильно воспроизводится на определенных этапах онтогенеза (см.). Пцр ISSR * ПЛР ISSR * ISSR-PCR or PCR of Inter-Simple Sequence Repeats – метод, суть которого заключается в том, что в качестве участков отжига праймеров используют микросателлитные локусы, а амплифицируют участки, находящиеся между их инвертированными повторами. Праймеры состоят из корового мотива, комплементарного микросателлитному повтору, и нескольких (1–4) якорных нуклеотидов на 51- или 31-конце, определяющих место отжига праймера. Мультилокусные спектры амплификации, получаемые в ISSRПЦР, насчитывают 10–60 полос, которые разделяют в агарозном или полиакриламидном геле. Преимущество метода по сравнению с RAPD-PCR заключается в том, что такой подход увеличивает точность отжига, воспроизводимость амплифицированных фрагментов и уменьшает анонимность амплифицируемых участков, поскольку о них, по крайней мере, известно, что это относительно короткие фрагменты ДНК, заключенные между инвертированными повторами микросателлитного локуса. Для проведения амплификации необходимо небольшое количество ДНК (5–50 нг на 1 реакцию). Не требуется предварительного