* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки
ФЕРМЕНТЫ 634 к л е т к а х ( н а п р . в д р о ж ж а х ) о н м о г быть п о л у чен п р е п а р а т и в н о в з н а ч и т е л ь н ы х к о л и ч е с т в а х . Руководствуясь окраской активной группы, у д а л о с ь , о т щ е п и в ее от н о с и т е л я , и з о л и р о в а т ь ее, п о л у ч и т ь в к р и с т а л л и ч е с к о м , х и м и ч е с к и ч и стом в и д е и п о д в е р г н у т ь х и м и ч . а н а л и з у . О н а оказалась родственной с витамином В ( K u h n и сотр.) и п р и н а д л е ж и т к г р у п п е ш и р о к о р а с пространенных пигментов—лиохромов и л и ло вимое (см.), п р е д с т а в л я я собой ф о с ф о р н о к и с лый э ф и р о д н о г о и з ф л а в и н о в ; э л е м е н т а р н ы й состав е е — C , H N 0 P . И м е н н о с э т и м Ф . б ы л и ^осуществлены о п и с а н н ы е в ы ш е о п ы т ы с р а с щ е п л е н и е м и в о с с о е д и н е н и е м его к о м п о н е н тов. Т . к . б л и з к и й д е р и в а т ф л а в и н а н е д а в н о синтезирован Куном, то можно полагать, что в скором времени удастся впервые получить и с к у с с т в е н н ы м п у т е м Ф . .соединив с и н т е т и ч е с к и полученную акти вную группу(флавин - фосфорную к-ту) с естествен ным носителем— б е л к о м ( р и с . 2). Препараты кри сталлических Ф. (см. в ы ш е ) — у р е а зы, пепсина—тояхе д а ю т с п е к т р ы поглощения, но не в видимой, а 440 469 4&iO S t O в ультрафиолето длина волны/mpl в о й о б л а с т и . Эти Рис. 2. Спектр желтого дыха с п е к т р ы б ы д и у с тельного фермента. тановлены как&ко с в е н н ы м п у т е м (измерением и н а к т и в и р у ю щ е го д е й с т в и я л у ч е й р а з н о й д л и н ы в о л н ы ) , т а к и п р я м о й с п е к т р о г р а ф и е й ; о б а метода д а ю т тождественные результаты. Подученные спект р ы очень п о х о ж и м е ж д у собой и б л и з к и к с п е к т р у т и р о з и н а ; м о ж н о д у м а т ь , что т у т , в о т л и чие от с п е к т р о в г е м и н о в ы х и ф л а в и н о в ы х ф е р ментов, определяется спектр не активной груп пы, а коллоидального носителя.—Ценные пред ставления о строении и х и м . природе Ф . дало также изучение т. н. « ф е р м е н т н ы х м о д е л е й » . Уголь, содержащий железо, послу ж и л В а р б у р г у прототипом строения дыхательно го Ф . Д е й с т в и е Ф . карбоксилазы (см.) о к а з а л о с ь возможным воспроизвести п р и помощи синте тически полученных замещенных аминов (Langenbeck). Л а н г е н б е к п р е д л а г а е т р а з л и ч а т ь м е жду а к т и в н ы м и и а к т и в и р у ю щ и м и г р у п п а м и в м о л е к у л е Ф . П е р в ы е — э т о те х и м . группировки, к-рые вступают во взаимодей ствие с с у б с т р а т о м и н е п о с р е д с т в е н н о ответ ственны з а каталитический эффект; а к т и в и р у ю щие ж е группы л и ш ь повышают каталитиче с к у ю ф у н к ц и ю э т и х а к т и в н ы х г р у п п , подобно тому к а к в химии красителей т. н. ауксохромные г р у п п ы п о в ы ш а ю т к р а с я щ у ю способность собственно х р о м о ф о р н о й г р у п п ы к р а с и т е л я . Систематическим и з у ч е н и е м в л и я н и я з а м е щ а ю щих, «активирующих» групп в .таких моделях н а к а т а л и т и ч е с к у ю способность последних удалось повысить таковую в весьма высокой степени, д о 4 ООО р а з п р о т и в н и з ш и х , н е з а м е щ е н н ы х а м и н о в . В пересчете н а м о л и п р е в р а щенного субстрата в минуту такие модели ока з ы в а ю т с я всего в 20 р а з слабее н а п р . к р и с т а л лических Ф . Нортропа, что, учитывая у ж е до стигнутое т ы с я ч е к р а т н о е п о в ы ш е н и е а к т и в н о сти, п р е д с т а в л я е т с я р а з н и ц е й , к - р у ю л е г к о удастся преодолеть. Представляется правдо 2 1 2 1 4 9 подобным п р е д п о л о ж е н и е , ч т о и естественная к а р б о к с и л а з а о б л а д а е т а н а л о г и ч н ы м строением, что а к т и в н о й , н е п о с р е д с т в е н н о о б у с л о в л и в а ю щ е й к а т а л и т и ч е с к о е д е й с т в и е «зимофорной» группой и тут является а м и н н а я группа, но что а к т и в и р у ю щ и е г р у п п ы е щ е н е с р а в н е н н о э ф ф е к т и в н е е , ч е м н а й д е н н ы е до н а с т , в р е м е н и в с и н т е т и ч е с к и х о п ы т а х . Этим п р е д с т а в л е н и е м н а м е ч а е т с я е щ е один м е х а н и з м в о з н и к н о в е н и я необычайно высокой каталитической с и л ы фер мента: в л и я н и е не только коллоидального н о сителя, но и вспомогательных активирующих г р у п п , в х о д я щ и х в состав собственно ф е р м е н т а т и в н о й ч а с т и м о л е к у л ы . — Относительно х и м . природы активной группы прочих Ф . , помимо у к а з а н н ы х выше, определенных представлений еще н е и м е е т с я . П о п ы т к и подойти к в ы я с н е н и ю ее п у т е м и з у ч е н и я в л и я н и я р а з л и ч н ы х с о е д и н е ний, с л у ж а щ и х реактивами н а определенные хим. группировки (реактивы на аминогруппу, на альдегидные, кислотные, основные группы), не дали пока достаточно я с н ы х и убедительных результатов. Величина м о л е к у л я р н о г о в е с а Ф . практически определяется размерами и х кол лоидального носителя, составляющего глав ную массу молекулы Ф . Д л я измерения моле кулярного веса применяют к а к химические, т а к и физические методы. Первые основывают с я н а воздействии и н а к т и в и р у ю щ и х Ф . соедине ний, н а п р . солей нек-рых металлов, и вычисле н и и « э к в и в а л е н т н о г о веса»; с о т к р ы т и е м г е м и н о вой природы нек-рых Ф. оказалось возможным вычислять м о л е к у л я р н ы й вес по содержанию ж е л е з а . И з ф и з . методов применялись измере н и я с к о р о с т и д и ф ф у з и и , в н о в е й ш е е время—• с е д и м е н т а ц и о н н ы й метод п р и п о м о щ и у л ь т р а центрифуги Сведберга. Полученные величины л е ж а т в пределах, обычно встречаемых д л я белков. Нек-рые данные сопоставлены в при водимой таблице. Моле куляр ный вес Б ОО О 20 О О О 50 О О О 35 О О О ДО 36 ооо 09 000 >40 000 50 000 ДО 70 000 Фермент Метод измерения Автор Инактивирование серебром Скорость диффу зии Скорость диффу » зии Пепсин кри Осмотическое " v сталлический давление I Скорость диф- фузии 1 Содержание 1 С1 и S ) Каталаза Скорость диффу зии Уреаза Инактивирование серебром Желтый дыха Седиментация в тельный Ф. ультрацентри Варбурга фуге Сахараза Эйлер Эйлер МелвинХыоз Нортроп Штерн Сейнер и Мирбак Сведберг С в о й с т в а ф е р м е н т о в . Ф. к а к к а т а л и з а т о р ы . У Ф . в особенно в ы д а ю щ е й с я с т е п е н и в ы р а ж е н о основное свойство к а т а л и з а т о р о в : способность в ничтоясных к о л и ч е с т в а х в ы з ы в а т ь о г р о м н ы й эффект в с м ы с л е у с к о р е н и я р е а к ц и и . У нее с т а р ы е н а б л ю д е н и я , о т н о с и в ш и е ся к весьма неочищенным п р е п а р а т а м , указы в а л и , что н а п р . о д н а ч а с т ь с ы ч у ж н о г о фер м е н т а ( х и м о з и н а ) способна в ы з в а т ь свертывание 400 000 ч а с т е й м о л о к а ; д е й с т в и е выделенного М е л д р е м о м и Р о у т о н о м ( M e l d r u m , Roughton)