* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

303 С Е Р Е Б Р Е Н И Я МЕТОДЫ 304 СЕРЕБРЕНИЯ МЕТОДЫ (см. т а к ж е Импрегна­ ция) с о п е р н и ч а ю т в м и к р о с к о п , т е х н и к е с к р а ­ сочными. Можно различать две категории С м . : старые методы в применении к свежим пережи­ вающим тканям и более новые на т к а н я х с пред­ варительной обработкой их.—Примером п е р ­ в о й к а т е г о р и и может служить обработка раствором ляписа однослойного эпителия. Ре­ дукция идет здесь в п р о м е ж у т к а х между клет­ ками, отчего получаются черные, извитые л и ­ нии в форме сети и негативный рисунок самих клеток. Берут напр. какой-нибудь перепонча­ тый орган (брыжейку, перикард) у только-что убитого животного, растягивают на пробке или восковой пластинке, укрепляют ежевыми иглами и п о г р у ж а ю т в 1%-ный и л и более сла­ б ы й р а с т в о р л я п и с а . В т е ч е н и е 1—10 м и н . п о я в ­ ляется молочного цвета муть, тогда ополаски­ вают п р е п а р а т дест. водой и в ы с т а в л я ю т в бе­ лой, лучше фарфоровой, наполненной дест. водой чашке н а свет. Наступает побурение— п р и з н а к редукции; после того переносят в дест. воду (прибавив до этого 2 з е р н ы ш к а поварен­ ной соли) 7 0 % - н ы й и 9 0 % - н ы й спирт. В кро­ веносные сосуды, легкое, серозные полости и тому подобные можно вводить вслед за раство­ ром ляписа теплый раствор желатины или по­ следняя впрыскивается в смеси с раствором ляписа. В роговице межуточные клетки (клетки переднего эпителия перед этим удаляются дей­ ствием пара) дают иногда позитивный, иногда негативный рисунок, тотально импрегнируясь вместе с отростками. Н а миелиновых волок­ нах серебро отлагается в перехватах Ранвье, причем захватываются также ближайшие части аксонов, отчего получаются кресты Р а н в ь е и Фромановские поперечные линии на аксоне. В некоторых органах ляпис вводится в глубь ткани шприцем Праваца. Кроме чистого рас­ твора л я п и с а (0,1—0,75%) иногда употребляют смеси, н а п р . 1 % A r g . nitr. и 2 % Ac. osmic. (Колосов). Прибавляют к нему также пикрино­ вую и азотную кислоты. Далее кроме Arg. nitr. употребляют еще ацетаты, пикраты, лактаты с е р е б р а , п р о т а р г о л и д р у г и е . В 1877 г . Г о й е р (Ноуег) впервые ввел аммиачное серебро. П о ­ мимо действия света д л я редукции можно упот­ реблять формалин, гидрохинон и пр., а для удаления излишков—гипосульфит. К о в т о р о й к а т е г о р и и с е р е б р е н и я от­ носятся методы с предварительной обработкой ткани. Очень многие из них удаются после универсальной фиксации формалином, особен­ но в соединении с резкой тканей на заморажи­ вающем микротоме. Одни из них элективно вы­ являют различные структурные детали, напр. аппарат Г о л ь д ж и , другие ж е по своей деталь­ ности могут заменить такие красочные методы, к а к гематоксилин-эозин. П р и этом серебрение можно дополнить докраской (шарлах-ротом, пикрофуксином и т. д.). Д л я фиксации форма­ л и н берется в растворе 10—14—20%; длитель­ ность—от 3 дней. У п о т р е б л я е т с я т а к ж е 9 6 % - н ы й алкоголь, чистый или с а м м и а к о м (0,5—1%); также формалин с алкоголем (60%) в отноше­ н и и 1:9; а ц е т о н , а ц е т о н п о п о л а м с ф о р м а л и н о м и ацетон с азотной к-той (10%). После формали­ новой фиксации иногда употребляется пиридин и л и ж е п и р и д и н п р и б а в л я е т с я к раствору сереб­ ряной соли. По Шульце фиксированные в формалине ткани перед серебрением очищают­ с я от н е г о в р а с т в о р е е д к о г о н а т р а . Д а л е е п е ­ ред серебрением при нек-рых методах вводят­ с я еще вещества, сходные по действию с про­ травами при красочных методах: мышьякови­ стая к-та, ураннитрат, танин, железные квасцы, бромистый аммоний, бромурал и др. Arg. nitr. употребляется в 1—10%-ных растворах; поль­ зуются также аргентамином, колярголом, кар­ бонатом, флюоридом, л а к т а т о м , нитритом се­ ребра. Особенно ценным оказалось азотное серебро (Гойер, Fajersztajn, Б е л ы п о в с к и й ) . Т к а н и п р и этих методах обрабатываются и в кусочках и в замороженных срезах. Очень большое зна­ чение имеет изменение коллоидной среды. Д л я этой цели употребляют заливку в ж е л а т и н у (12,5%, 20% и 24%), и л и ж е р а с т в о р A r g . nitr. смешивается с теплым раствором жела­ т и н ы (1 н а 1 000); у п о т р е б л я ю т е щ е и г у м м и ­ а р а б и к . Д л я с е р е б р е н и я с у щ е с т в у ю т самыеразнообразные приемы. Напр. срезы сутки ле­ ж а т в Arg. nitr., потом быстро проводятся через аммиачное серебро после легкого прополаски­ в а н и я в дест. воде и потом быстро подвергают­ ся редукции (Белыповский); или же срезы быстро проводятся через Arg. nitr., потом идет формалин, аммиачное серебро, аммиачная вода и т. д. (Гросс-Бельшовский). Кроме 20%-ного формалина для редукции употребляют еще виноградный сахар, гидрохинон, пирогаллол адурол, галловую к-ту и др. Очень черные сре­ зы можно ослабить 0,05%—0,2%-ным раство­ ром цианистого калия или марганцовокислого к а л и я . Последующее золочение срезов (на пор­ цию воды несколько капель 1 %-ного хлорного золота) и 5 %-ный гипосульфит бывают очень полезны, но не всегда обязательны. Наиболее в а ж н а я часть оканчивается с редукцией. В а ж н е й ш и е м е т о д ы второй категории. Для н е р в н ы х к л е т о к с отростками— м е т о д Г о л ь д ж и и К о к с а ( с м . Гольджи метод); для неврофибрил и нервных волокон—метод Р а м о н - и - К а х а л а ( с м . Рамон-и-Кахала методы окраски) и Бельшовского. Для безмякотных нервных волокон и окончаний имеют значение еще методы Гросс-Белыновского, Шульце и Р а х м а н о в а . Метод Гросс-Белыновского (моди­ ф и к а ц и я Л а в р е н т ь е в а ) : 1) ф и к с а ц и я в с м е с и : п о р о в н у 96 % - н ы й с п и р т , 1 % - н а я м ы ш ь я к о в и ­ стая к-та и нейтральный формалин в течение ч а с а ; 2) 10 % - н ы й н е й т р а л ь н ы й ф о р м а л и н — ч е т ­ в е р о с у т о к ; 3) з а м о р а ж и в а н и е с р е з о в ; 4) 20 % - н ы й A r g . n i t r . — 2 — 5 м и н . ; 5) 4 п о р ц и и 2 0 % - н о г о ф о р м а л и н а ; 6) а м м и а ч н о е с е р е б р о (контроль п о д м и к р о с к о п о м ) ; 7) а м м и а ч н а я в о д а ( / а м м и а ­ к а , / з в о д ы ) — п о л ч а с а ; 8) д е с т . в о д а ; 9) з о л о ч е ­ н и е ; 10) 5 % - н ы й г и п о с у л ь ф и т и т . д . — М е т о д О . Ш у л ь ц е : 1) ф о р м а л и н о в а я ф и к с а ц и я и з а м о ­ р а ж и в а н и е с р е з о в ; 2) р а з б а в л е н н ы й д е с т . в о д о й нормальный раствор едкого натра (для волокон 10 н а 50 в о д ы ) — с у т к и ; 3) д е с т . в о д а — 2 ч . ; 4) 1 0 % - н ы й A r g . n i t r . — - 1 2 — 2 4 ч . ; 5) р е д у к ц и я : 2,5 г и д р о х и н о н а , 100 см дест. воды и 5 см ф о р м а л и н а р а з в е с т и в 2 0 , 1 8 0 и 120 р а з ( д е л а т ь п р о б ы ) . — М е т о д А . В . Р а х м а н о в а : 1) ф и к с а ц и я 96%-ным спиртом; далее абсолютный спирт и п а р а ф и н ; 2) с р е з ы н а с т е к л е д е р ж а т ь п р и 37°" с у т к и в 1 0 % - н о м A r g . n i t r . ; 3) д е с т . в о д а ; 4) р е д у к ц и я : г и д р о х и н о н 0 , 2 5 , с е р н и с т о к и с л ы й н а т р и й к р и с т а л л и ч е с к и й 2,0, у г л е к и с л ы й к а ­ л и й 1,5, д е с т . в о д а 2 5 , 0 . f 2 3 2 3 3 Для м и к р о г л и и (мезоглии)—метод Г о р т е г а : 1) ф и к с а ц и я : б р о м и с т ы й а м м о н и й 1 0 , 0 , н е й т р а л ь н ы й ф о р м а л и н 70,0, д е с т . в о д а 400,0; 2) з а м о р а ж и в а н и е с р е з о в ; 3) д е с т . в о д а с а м м и а ­ к о м ( н а 5 0 — 2 к а п л и ) ; 4) а м м и а ч н о е с е р е б р о : к 5 см 1 0 % - н о г о A r g . n i t r . п р и б а в и т ь 20 о м 3 3