* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки
147 ПРЕЦИПИТАЦИЯ 148: гена (реакция Закс-Георги) либо лее предвари тельно концентрируется (цитохолевая, антиген МйПег&а). В обоих случаях получается Vollextrakt. При высушивании сердца появляется ряд веществ, нарушающих правильный ход осадоч ных реакций; вещества эти повидимому иден тичны с гемотоксическими составными частями Вассермановского • антигена и растворимы в эфире и ацетоне. Для устранения их при приго товлении осадочного антигена из сухих орга нов порошок предварительно обрабатывается эфиром, ацетоном&и т. п. и затем экстрагирует ся спиртом (антигены Кана, Мейнике, Верна, -Сигма). Большинство антигенов, применяемых в RW, дает недостаточно лябильвые взвеси и непригодно д л я осадочных реакций. Наоборот, все осадочные экстракты могут служить так же антигеном и для R W . Осадочные антигены применяются в виде взвеси в солевом растворе разной концентрации (0,85—3%). Д л я дости жения нужной лябильности антигены должны обладать подходящей дисперсностью. Д л я это го их нужно разводить соответствующим обра зом солевым раствором; кроме того они должны «созреть». Созревание достигается или двухмоментностью разведения (Закс-Георги, Мюл лер) или оставлением на 10—-30 мин. после раз ведения до прибавления к сыворотке (Кан, цитохолевая). С ы в о р о т к а . Для. получения более спе цифических результатов почти все авторы реко мендуют применять для осадочных реакций •ийактивированные сыворотки. Инактивирование стабилизирует сыворотки. Оно произво дится подогреванием при 52-—56° з течение 20—30 мин. Только Мейнике для своих MTR и M K R рекомендует применение активных сы вороток. Инактивирование сывороток по его мнению ведет при этих реакциях к ослаблению «специфичности. Стабилизирование сывороток у Мейнике достигается, применением 2 и 3% раствора NaCI для разведения антигена. В ста рых, долго сохранявшихся сыворотках наблю дается 2 различных процесса: с одной сторо ны, стабилизация и х , ведущая к ослаблению •их действия, с другой—-процесс насыщения СО,, который может вести к неспецифическому выпадению хлопьев.—П р и р о д а реак т и в н ы х т е л с ы в о р о т к и . Преципитирующие свойства сыворотки связаны с гло булинами подобно комплементсвязывающим при Вассермана реакции (см.). Хлопья состоят почти полностью из липоидов экстракта. Воп рос, входят ли туда составные части сыворот ки, не разрешен окончательно. Большинство •авторов находило в хлопьях следы глобулинов сыворотки; последние тесно связаны с липои дами и трудно растворимы. Р е а к ц и я З а к с - Г е о р г и (Lactoreaction^ 1918). Антигеном служит экстракт из свежего бычьего сердца. Заметив еще при из учении RW повышение чувствительности ан тигена при добавлении к нему холестерина, З а к с использовал это свойство при приготовле нии антигена для своей осадочной реакции. Кроме того им было обращено особое внимание на, зависимость чувствительности антигена не только от его хим. состава, но и от его физикохимич. состояния—степени его дисперсности. Более грубая и менее устойчивая взвесь полу чается при медленном смешивании экстракта с «физиол. раствором; более тонкая и более устой чивая—при быстром смешивании (Sachs, Ron«doni). Н а холоду и при комнатной t° появляют ся иногда неспецифические хлопья: такой пре ципитат реверсибилен и снова растворяется, при 3 7 ° . — П р и г о т о в л е н и е э к с т р а к т а . Бычье сердце, освобожденное от сухожилий и жира, пропускают через мясорубку, отжима ют и заливают 5-кратным количеством 95°-ного спирта; встряхивают с бусами 4—5 часов, ос тавляют при комнатной t° до следующего дня. Спустя 24 часа отфильтровывают через бумагу и дают отстояться 2 дня на леднике. Снова от фильтровывают. Фильтрат представляет «пер вичный основной экстракт». Этот «основной экстракт» разводят 95°-ным спиртом в 2, 3 и 4 раза. К каждому из трех разведений добавляют 1 %-ного спиртового раствора холестерина по 0,3; 0,45; 0,6 и 0,75, получая т. о. 12 различных растворов. Каждый из этих растворов испытывается на ряде люетических и нормальных сы вороток. Обычно хорошие результаты дает сле дующее разведение антигена: 10 см* основного экстракта 1 : 4 и 0,45 1 %-ного спиртного рас твора холестерина". Разведение антигена& д л я постановки опыта делают 5-кратным количе ством физиол. раствора в два момента. Отме ряют в пробирку нужное количество экстракта и быстро смешивают с равным количеством 0,85%-ного физиол. раствора NaCI; встряхи вают^ через 5—-30 секунд прибавляют осталь ной физиол. раствор. Сыворотки применяются в инактивированном виде. Т а б л . 1. С х е м а п о с т а н о в к и о п ы та. Сыворотка од о,1 Ф и З и о л . 0,85%-ный раствор . . . . . 0,4 0,4 Разведенный антиген 0,5 — С п и р т , р а з в е д е н н ы й i/e ( к о н т р о л ь ) . . — 0,5 Оставляют в термостате на 18 — 24 часа. Регистрация результатов производится про стым глазом, лупой или еще лучше аглютиноскопом. В положительных случаях появляются хлопья—мелкие или крупные, иногда полно стью оседающие на дно с просветлением сверх стоящей жидкости. Нормальные сыворотки остаются равномерно опалесцирующими. Кон трольные пробирки прозрачны без хлопьев. Антиген сам по себе также не должен флокулирОвать. Реакция Закс-Георги применялась, как макрореакция (Scheer, Lipp, Kafka). Бла годаря постоянству результатов и специфич ности она получила очень широкое распростра нение к а к у себя на родине, в Германии, так и у нас, а также в Англии и Америке. Существует громадная литература, касающаяся теории и практики реакции Закс-Георги. Цитохолевая р е ак ци я Закс -Ви т е б с к о г о (Witebsky, 1928). Преимуще ством этой реакции является большая скорость получения результатов. При ее разработке Закс и Витебский руководствовались данными, почерпнутыми из изучения реакции Кана, к а к то: применение концентрированного антигена, употребление его в виде грубо дисперсной взве си, смешивание антигена и сыворотки в неразведенном виде, встряхивание смеси. П р и г о т о в л е н и е а н т и г е н а . Выпаривают на водяной бане или в вакуум-аппарате «первич ный основной экстракт» Закса из свежего бычь его сердца (см. выше). Полученный вязкий жел товатый остаток растворяют в горячем спирте в объеме /з выпаренного экстракта. Оставляют на 2—3 суток при комнатной t ° ; выпадает оса док, плотно пристающий к дну и стенкам со суда; прозрачный экстракт сливают и доба вляют от 0,2% до 0,6% холестерина. Количе ство добавляемого холестерина устанавливаетх