* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

143 ПРЕЦИПИТАЦИЯ 144 лика. После того как на .8—10-й день после ведении 1 : 1 000 и с разными гетерологическипоследней инъекции пробное кровопускание ми антигенами в разведениях 1 : 200 и 1 : 1 000. покажет достаточное содержание преципити­ Сыворотки, дающие помутнение с гетерологинов (см. ниже), животному делается крово­ ческими антигенами в разведениях 1 : 200, для пускание частичное&или тотальное. Для частич­ употребления непригодны. ного самым удобным способом является пунк­ Сыворотка должна храниться на холоду и без ция сердца, причем можно без у щерба для жи­ доступа света, однако и при этих условиях она вотного получить от кролика до 40 см крови, постепенно слабеет. Наступающее иногда по¬ Т; е. до 15—20 см сыворотки. Для тотального . мутнение преципитационной сыворотки, р а з ­ обескровливания можно, обнажив в хлоро­ литой в ампулы, может зависеть от разных при­ формном наркозе сонную артерию и наложив чин: от бактериального загрязнения (необхо­ зажим на периферический конец ее, выпустить димо повторное фильтрование), от выделения кровь из центрального конца. К преципитирую- белков, к-рое вызывается иногда недостаточ­ щей сыворотке необходимо предъявлять сле­ ной доброкачественностью стекла (осадок мож­ дующие требования: 1) она должна быть про­ но отцентрифугировать), иногда от холода зрачна и не должна опалесцировать, 2) иметь (муть исчезает при Подогревании). Наконец высокий титр, 3) быть специфичной. Для сте­ нужно принять во внимание возможность т. н. рилизации и просветления сыворотки ее филь­ аутопреципитации, зависящей от одновремен­ труют через свечи Беркефельда или, что еще н о г о присутствия в сыворотке преципитина и удобнее, через фильтры Зейца. В том и в дру­ преципитиногена. Это явление особенно обна­ гом случае фильтрация ведется с помощью руживается при добавлении к одной сыворотке водоструйного насоса. Опалесценция сыворо­ другой, полученной от такого же животного, ток возможно зависит от пищеварения, поэтому иммунизированного таким же видом белка. рекомендуется кроликов в день кровопускания Поэтому смешивание разных порций сывор т¬ с-утра не кормить. . & ки не рекомендуется. Она лучше сохраняется Определение титра а н т и с ы - в сухом виде (высушивание производится ри в - о р о т к и . Если оставить в стороне способы, t°, не превышающей 45°, в вакууме или аппа­ имеющие значение тдлько для специальных ратах типа Фауст-Гейма). Недостатком Td ких работ, как напр. способы Неттала и Инчли или высушенных сывороток, к-рые сохраняют свою Вассермана и Шютце (Inchley, Schutze), то ме­ силу весьма продолжительное время, является тодами, практически применяемыми, являются необходимость сохранения их в особых усло­ два: 1) метод смешивания и 2) кольцевой или виях (вакуум-эксикатор) и опалесценция при . метод наслоения. В том и другом случае анти­ растворении. Оттоленги, Эйслер и др. (Ottolenghi,. ген разводится (для зоопреципитинов кровя­ Eisler) предлагают засушивать сыворотку в ная сыворотка физиол.раствором NaCI 1 : 1 ООО, определенно отмеренных количествах (напр. 1 : 10 ООО, 1 : 20 000), а антисыворотка приме­ 0,1 см ) на бумаге, лучше на черной (Эйслер). няется без разведения. Опыт ставится в 4 про­ Широкого распространения этот способ не по­ Я . Левин. бирках: в I , I I , I I I наливается по 1 ем разве­ лучил. денной сыворотки, в I V 1 см физиол. раствора. Преципитатные реакции в серодиагностике При кольцевом методе пипеткой по стенке или сифилиса, реакции, при к-рых в смеси люетисквозь слой антигена осторожно спускается ческой сыворотки с т. н. антигеном получается 0,1 см антисыворотки, к-рая располагается на преципитат, видимый макро- или микроскопи­ дне под антигеном. Титр определяется по про­ чески, в То время как нормальные сыворотки бирке с наивысшим разведением антигена, ко­ появления осадка не вызывают. Название ан­ торое еще дает помутнение или кольцо почти тиген является по существу неправильным, т. к. немедленно, самое позднее спустя 1—2 минуты. при введении его животному специфических Титрование бактериопреципитинов не может антител не получается, и он является собствен­ быть проведено так же точно в количественном но весьма неопределенным и разнообразным отношении, как титрование зоопреципитинов, по способу приготовления экстрактом из раз­ т, к. определение количества преципитиногена ных органов разных животных, аналогичным в. случае бактерий чрезвычайно затруднитель­ антигену, применяемому при RW. но и ненадежно. Поэтому имеются предложе­ И с к и й о з о ж с ре о ния исходить из какого-нибудь количества ан­ я в л е н итя оR р и мчн е гси е а в т о р ы бу к а зр .в а Уи е авПк ок а к пноас л ес н п в ­ W о ы л н . о о ­ тигена и принять количество преципитинов н у ю п р и ч и н у р е а к ц и и ( G a y и Moreschi; L e v a d i t i , E l i a s , Porges, M i i р и . (1907) р ы в 1 см сыворотки, протитрованной им, за еди­ б л ю д а л о б рcаhзa e lа s иие дм аукгр оес)к оМ и хпареелциисп и т а т а ппреи вн айс лн а ­- & ницу. Гамбургер и Шур (Hamburger, Schur) н и и и е и н а к т и о в рн в а н н о й л ю е тп ,ч е с к о й с ы в о р о т к и н а в ооде- • ви о и предложили определять центрифугированием н ы й э к с т р а к т и з л ю е т и ч е с к о й п е ч е н и . О д н а к о б л а г о д а ­ н ос оч ос с у уль блю в градуированных трубочках объем получаю­ р яи х аеедл и т а т о с тнаолмоус ьпп о т о я н н т ва м ерчеезн н ытма.т о ви хн а л и с д е н и е М чти М пра­ щегося осадка. Реакция бактериопреципита- в и л ь н о иссат о л к о в а л с а м о е я е зл е н и е , у к а з а в , ч таое э к с т р а к т в ции также может быть поставлена по способу с о д е р ж и т в с е б е п р е ц и п и т и н о г е н . а с ы в б р о т к а — п р е ц и п и т и н . Я ал п м у смешивания или по способу наслоения (кольце­ к коо б с тп а ь п ( J a c o b s tеh a l ) н а б л ю д а л с и о с о щ ьею и л ь т р а м и ­ вле и р ер вая проба). При первом способе к определен­ м р н с к о к о г о о я н т и не н а пи е ц и п и т а ттаи чп р к о й м е ш в н и о т кВ а с сЭ т аа овс а г сифили ес сы ор и. ному количеству фильтрата, содержащего пре- « о п т и ч е с к а я с е р о д и а г н о с т и к а » н е п о л у ч и л а п р а к т и ч е с к о ­ бл г даря еле ны и ципитиноген, напр.. 5 см , прибавляются нисхо­ г о ппор и м еинтеенли я ы х а р о з у л ь т аотбоивл. и ю рнуеко п р е дГ и д н к а х ( B n iсcлkа, ­. бо лож ьн е Б и а дящие дозы сыворотки—1,0, 0,5, 0,2 см . Смесь Hidaka) для придания явлениям П . большего постоянства оставляется при 37° на.24 часа. Во избежание в в е л и н е к - р ы е и з м е н е н и я у с л о в и й к а к ф и з . п о р я д к а ( с в я ­ з ва а о о у нтриф ров и так и е­ прорастания, к-рое будет мешать оценке реак­ с ыи е н(идео б н в л х н л е д к , э ц е т р а к т уу гсим о л )а. н Э е )и, р е а к ц и их итмаи чж е к а е и кс т к ции, оба ингредиента должны быть стерильны. н е п о л у ч и л и п р а к т и ч е с к о г о р а з в и т и я , н о т е о р е т и ч е с к и е Иногда реакция наступает только спустя 48 ча­ у к а з а н и я а в т о р о в н а ш л и п р и м е н е н и е п р и р а з р а б о т к е б о ­ сов. Гораздо яснее кольцевая проба (Ascoli, л е е с о в е р ш е н н ы х & м е т о д о в . чин йнике т Hauser), которая производится так же, как и в о с аН а ч н ыа я р с а1917 йг., е гМ е п е р в а я(Meinicke) ад аиея —ц«евлоы й нр я д . до х е кци : о модифик ц дя ая» случае зоопреципитации.—-Затем сыворотка ис- ( « W a s s e r m e t h o d e » ) и в т о р а я — « с о л е в а я » р е а к ц и я ( « К о с п пытывается на специфичность. Для, этого реак­ s a l z m e t h o d e » ) д в у х м о м е н т н ы и и м е ю т с е й ч а с т о л ь к о и с т о ­ ич с и кий р их вы лас ция ставится с гомологическим антигеном в раз­ р в я зеь км ейж ди т е.о р е т и ч е сш е н и е и нстоел еевсо. г оВр а н н о в е с и яя в и е д ыь. с у П и нару м в ср 7 3 9 3 3 3 3 3 3 3