* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

58 МОЧА 64 с о д е р ж а т с я э т и к-ты, н о г д е м о г у т быть и д р у г и е а з о ­ тистые в е щ е с т в а ; т а к о й м е т о д о п р е д е л е н и я н е я в л я е т ­ ся с л е д о в а т е л ь н о н а д е ж н ы м . П о м е т о д у С а с с а (Sassa) 200—1 ООО см М . ( с м о т р я п о с о д е р ж а н и ю о б ­ щего к о л и ч е с т в а N ) с м е ш и в а ю т с н е б о л ь ш и м к о л и ­ чеством у к с у с н о й к-ты и в ы п а р и в а ю т н а в о д я н о й б а н е до с и р о п а . П о о х л а ж д е н и и д о б а в л я ю т н а 1 л в з я т о й М. 10—20 см* 1 0 % - н о г о р а с т в о р а H S 0 д о п о с и н е н и я б у м а ж к и к о н г о и с м е ш и в а ю т с 2—3 о б ъ е м а м и ( с ч и т а я на о б ъ е м и м е ю щ е й с я в ы п а р е н н о й ж и д к о с т и ) 9 5 ° - н о г о алкоголя, размешивают, отфильтровывают осадок и промывают е г о 70°-ным а л к о г о л е м . С о е д и н е н н ы е ф и л ь ­ траты р а з в о д я т д в о й н ы м о б ъ е м о м в о д ы , о с а ж д а ю т мелко р а с т е р т ы м п о р о ш к о м г и д р о о к и с и б а р и я , п р и ­ бавляя нек-рый избыток е г о , у д а л я е м ы й затем т о к о м С 0 . Н е фильтруя жидкости, ее сильно сгущают на в о д я н о й б а н е , о т ф и л ь т р о в ы в а ю т о с а д о к и п р о м ы ­ вают е г о в о д о й , н е с о д е р ж а щ е й С 0 . Ф и л ь т р а т и н р о м ы вные в о д ы в н о в ь в ы п а р и в а ю т н а в о д я н о й б а н е д о густого сиропа, который в т е п л о м виде растирают с предварительно прокаленной инфузорной землей, так чтобы п о л у ч и л с я в л а ж н ы й п о р о ш о к , к - р ы й с м е ш и в а ­ ют, с м о т р я п о е г о к о л и ч е с т в у , с 300—1 000 см смеси эфира с 95°-ным а л к о г о л е м (1:2) и п р и ч а с т о м в з б а л ­ тывании оставляют в закупоренной склянке на су­ тки. О с а д о к о т ф и л ь т р о в ы в а ю т , п р о м ы в а ю т д в а р а з а смесью э ф и р а с а л к о г о л е м , в ы с у ш и в а ю т н а в о д я н о й бане и р а с т и р а ю т в т о н к и й п о р о ш о к . П о л у ч е н н у ю м а с ­ су, д л я о с в о б о ж д е н и я е е от м о ч е в и н ы , и з в л е к а ю т а б с о л ю т н ы м а л к о г о л е м в т е ч е н и е 20 ч а с о в в э к с т р а к ­ ц и о н н о м а п п а р а т е , к - р ы й д о л ж е н быть з а к р ы т х л о р кальциевой трубкой. П о с л е этого порошок высуши­ вают н а в о д я н о й б а н е , р а с т и р а ю т в о з м о ж н о м е л ь ч е и вновь извлекают в аппарате абсолютным а л к о г о ­ лем в т е ч е н и е 10 ч а с о в . О с т а в ш е е с я н е р а с т в о р е н н ы м вещество отфильтровывают и извлекают т е п л о й в о д о й , так, ч т о б ы о б ъ е м р а с т в о р а б ы л 100—200 см ; жид­ кость ф и л ь т р у ю т . В 20—25 см р а с т в о р а о п р е д е л я ю т по с п о с о б у К ь е л ь д а л я с о д е р ж а н и е N . К д р у г о й п о р ц и и в 40—50 см п р и б а в л я ю т п о п е р е м е н н о 20 %-ный р а с т ­ вор у к с у с н о й о к и с и р т у т и и 10 %-ный р а с т в о р с о д ы , пока не п о л у ч и т с я ж е л т ы й и л и красный осадок, удерживающий свою окраску при стоянии. Осадок, с о д е р ж а щ и й о к с и п р о т е и н о в ы е к-ты, о т ф и л ь т р о в ы в а ю т , промывают и в н е м вместе с фильтром о п р е д е л я ю т содержание N (без добавления катализаторов, но с применением сернистой щелочи при отгонке N H ) . В фильтрате вместе с промывными водами т о ж е о п ­ ределяют (ради контроля) содержание N . 3 2 4 2 2 3 3 3 3 3 Открытие уробилина. I. Способ Н е н ц к о г о и З и б е р (Nencki, Sieber). К 15 см М. прибавляют 4 капли соляной к-ты и 6 см амилового алкоголя, смесь в про­ бирке несколько раз перепрокидывают, не взбалтывая. К отстоявшемуся амиловоалкогольному раствору, который в случае содер­ жания уробилина окрашен в б. или м. ин­ тенсивный розово-красный цвет, прибавля­ ют несколько капель профильтрованного раствора, содержащего 1 г хлористого щгнка в 100 г этилового алкоголя и смешанного с таким количеством нашатырного спирта, чтобы был слышен резкий запах последне­ го и чтобы образовавшийся вначале белый осадок почти растворился. В случае присут­ ствия в М. уробилина получается в амиловоалкогольном растворе красивая флюорес­ ценция: в проходящем свете жидкость име­ ет розово-красный цвет и прозрачна, если не считать выпавшего белого осадка цинко­ вых солей, в отраженном же свете кажется мутной и окрашенной в зеленый цвет. (Ха­ рактерный спектр уробилина при этой про­ бе, см. Спектральный анализ, Уробилин.)— П . С п о с о б Ш л е з и н г е р а - в видоизмене­ нии Гильдебрандта (Hildebrandt). Смешива­ ют равные объемы М. и реактива, к-рый со­ стоит из взвеси 10 г уксусноцинковой соли в 100 г винного спирта и перед употреблени­ ем должен быть хорошо взбалтываем. Смесь М. с реактивом оставляют на ночь и М. сли­ вают с отстоявшегося осадка или отфильтро­ вывают от него. В случае содержания уроби­ лина получается флюоресценция и харак­ 3 3 терный спектр. Таким путем можно открыть 1 ч. уробилина в 50 000 ч. М. В случае содер­ ж а н и я в М. порфиринов эта проба не годит­ ся. В присутствии в М. желчных пигментов их предварительно осаждают ВаС1 при кис­ лой реакции. Если в исследуемой М. был осадок, М. непосредственно перед испытани­ ем нужно в з б о л т а т ь . — I I I . С п о с о б Ф л о ­ р а н с а (Florence): перепрокидывают, не взбалтывая, смесь 3 см М. и 6 см реактива следующего состава: 50 г пиридина, 50 г ал­ коголя, 50 г хлороформа, 7,5 з уксусноцин­ ковой соли. Оставляют стоять, причем обра­ зуются два слоя; нижний слой в присутствии уробилина дает зеленую флюоресценцию, при наличии уробилиногена зеленая флю­ оресценция появляется мало-по-малу. При содержании же в моче билирубина нижний слой имеет зеленоватую окраску и вскоре начинает флюоресцировать.—IV. М е т о д Г о т ь е и М о н о (Gautier, Monod). К 50 ом М. прибавляют 4 капли крепкой ук­ сусной кислоты (до ясно кислой реакции) и, взбалтывая, 25 капель 1 %-ного спирто­ вого раствора иода, добавляют хлороформа с содержанием тимола, сильно взбалтывают. К хлороформному раствору приливают рав­ ный объем профильтрованного спиртового раствора уксусноцинковой соли (500 см 93%-ного алкоголя, 3 г цинковой соли, 2 ом уксусной к-ты) и взбалтывают. В присут­ ствии уробилина получается красивая зе­ леная флюоресценция. При этом методе кро­ ме готового уробилина обнаруживается и уробилин, образовавшийся при окислении уробилиногена.—Кроме указанных мето­ дов было предложено несколько других, представляющих те или иные модифика­ ции вышеописанных способов. 2 3 3 3 3 3 К о л и ч е с т в е н н о е о п р е д е л е н и е уро­ б и л и н а . I . Снектрофотометрические методы с о ­ мнительны у ж е п о т о м у , что н е л ь з я ручаться з а чис­ тоту препаратов уробилина, с л у ж и в ш и х стандартами при определении; даваемые авторами величины для отношения светопоглощения (А) расходятся весьма з н а ч и т е л ь н о ( о т 0,000017 д о 0,031825). С п е к т р о ф о т о м е т р и ч е с к и е м е т о д ы М ю л л е р а , Т с у ш и й я ( F r . Muller, Tsuchiya) и д р . основаны на предварительном удалении других пигментов щ е ­ лочным раствором В а С 1 , о с а ж д е н и и у р о б и л и н а п у ­ тем насыщения ( N H ) S 0 , выделении уробилина из п о л у ч е н н о г о о с а д к а п р и п о м о щ и с е р н о й к-ты, р а с ­ творении в смеси спирта с эфиром и спектрофотометрическом определении уробилина в полученном рас­ творе.—II. В е с о в о й м е т о д Г о п п е-3 е й л е р а ( G . Hoppe-Seyler). У р о б и л и н о с а ж д а е т с я , как п р и спектрофотометрическом методе,и извлекается из осад­ ка смесью хлороформа с алкоголем; полученный рас­ твор промывают водой, хлороформный слой фильтру­ ю т , в ы п а р и в а ю т и о с т а т о к в з в е ш и в а ю т . Этот м е т о д д а е т ч и с л а з н а ч и т е л ь н о в ы ш е и с т и н н ы х . — I I I . М ет о д В и г л е ц и о ( V i g l e z i o ) . Р а с т в о р я ю т 240 г ( N H ) S 0 в 300 см M . , п о д к и с л е н н о й у к с у с н о й к - т о й . Осадок отфильтровывают, промывают насыщенным раствором ( N H ) S 0 , высушивают на воздухе и извле­ кают 300см алкоголя; полученный раствор наливают в бюретку. В стаканчик помещают 1 0 с м 6 0 % - н о г о алко­ голя, 2 капли нашатырного спирта и 2 капли 2 %-ного раствора Z n C l . И з бюретки приливают полученный раствор уробилина до первого появления зеленой флюоресценции, а затем приливают дальше до появле­ ния характерной для уробилина полосы поглощения (на это т р е б у е т с я п р и м е р н о т р о й н о е к о л и ч е с т в о ) . П р и вычислении принимают во внимание, что с р а с ­ т в о р о м , с о д е р ж а щ и м 0,01 г у р о б и л и н а в 100 cut с п и р т а , первая флюоресценция появляется по добавлении 0,5 см р а с т в о р а , а п о л о с а п о г л о щ е н и я — п о д о б а в л е н и и 1,6 см . М е т о д п р о с т о й , н о д а ю щ и й л и ш ь п р и б л и з и ­ тельные результаты. Весьма приблизительные резуль­ таты дают и д р у г и е методы о п р е д е л е н и я у р о б и л и н а . Точное определение возможно только путем перевода уробилина в уробилиноген и определения послед­ н е г о п о с п о с о б у Х а р н а с а (Charnass) ( с м . н и ж е ) . 2 4 2 4 3 4 2 4 4 2 4 3 3 2 3 3 3