
* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки
209 МИКРООРГАНИ ЗМЫ 210 ная под м и к р о с к о п о м ч а с т ь его с о д н и м п р о стейшим, н а и б о л е е у д а л е н н ы м от соседей, отделяется, и с о д е р ж и м о е у п о т р е б л я е т с я д л я засева (способ О е Ы е г & а ) . ( В о з м о ж н о п р и м е нение м и к р о м а н и п у л я т о р а . ) П р и к у л ь т и вировании п р о с т е й ш и х и н о г д а у п о т р е б л я е т ся в л а ж н а я к а м е р а и л и в и с я ч а я к а п л я (камера Ш у л ь ц а ) . — В з а в и с и м о с т и от р о да п р о с т е й ш и х п р и м е н я ю т с я р а з л и ч н ы е п и тательные с р е д ы : а г а р к а к т а к о в о й , а г а р с бульоном, с наетоем сена, а г а р Нелера, кровяной, сывороточный, белково-яичная среда и т . д . — Ч т о к а с а е т с я к о н ц е н т р а ц и и водородных и о н о в в п и т а т е л ь н ы х с р е д а х , то часть свободно ж и в у щ и х п р о с т е й ш и х п е реносит д о в о л ь н о ш и р о к и е к о л е б а н и я (Bo do edax — р Н 4,8—-9,6), у д р у г и х г р а н и ц ы уже, и особенно у з к и о н и у п а р а з и т и ч е с к и х простейших. С и л ь н о е р а з в и т и е б а к т е р и й в культурах быстро изменяет р Н с р е д ы . — Свободно ж и в у щ и е п р о с т е й ш и е в п р е о б л а дающем б о л ь ш и н с т в е к у л ь т и в и р у ю т с я л е г ко. Многие с в о б о д н о ж и в у щ и е а м е б ы х о р о шо р а з м н о ж а ю т с я н а п р о с т о м а г а р е в сме шанной к у л ь т у р е с б а к т е р и я м и . Р е к о м е н дуется способ Ф р о ш а и М у т о н а (Frosch, Mouton): ч а ш к а с а г а р о м з а с е в а е т с я п о д х о дящим в и д о м б а к т е р и и р а д и а л ь н ы м и ш т р и хами, о т с т у п я от ц е н т р а . В ц е н т р а л ь н у ю часть ч а ш к и в н о с и т с я м а т е р и а л , с о д е р ж а щий а м е б ы , к - р ы е и р а з м н о ж а ю т с я по х о д у б а к т е р и а л ь н о й к у л ь т у р ы . Свободно ж и в у щие ж г у т и к о в ы е ч а с т ь ю в ы р а щ и в а ю т с я н а среде К н о п п а и н а д р у г и х м и н е р а л ь н ы х средах; свободно ж и в у щ и е и н ф у з о р и и к у л ь т и в и р у ю т с я в смеси с б а к т е р и я м и . Особенное з н а ч е н и е имеет к у л ь т и в и р о в а ние п а р а з и т и ч е с к и х п р о с т е й ш и х . С одной стороны оно я в л я е т с я е д и н с т в е н н ы м д и а г ностическим с р е д с т в о м п р и с к у д н о м , н е д о ступном д л я м и к р о с к о п и ч е с к о г о и с с л е д о в а ния к о л и ч е с т в е в о з б у д и т е л е й , с д р у г о й — предоставляет количественно достаточный материал д л я всестороннего изучения про стейших. К у л ь т и в и р о в а н и е п а р а з и т и ч е с к и х простейших производится и л и на ж и д к и х средах и л и н а т в е р д ы х , к о т о р ы е п р и этом д о л ж н ы быть д о с т а т о ч н о в л а ж н ы м и . Содер жание в среде ж и в о т н о г о и л и л и ч н о г о б е л к а является обязательным.—При культивиро вании к и ш е ч н ы х п р о с т е й ш и х в с е г д а н у ж н о иметь в в и д у п р о с т е й ш и х с а п р о ф и т о в , ц и с т ы которых пассивно проходят к и ш е ч н и к вме сте с п и щ е й (Darmpassanten; а м е б ы т и п а L i m a x , ж г у т и к о в ы е и з р о д а Prowazekia и т. д . ) . В с в е ж е в ы д е л е н н ы х faeces о н и в ы ходят и з цист; п р и посеве с ц е л ь ю в ы д е л е н и я паразитических простейших вырастают и могут д а в а т ь п о в о д к д и а г н о с т и ч е с к и м о ш и б кам. П р и к и ш е ч н ы х к а т а р а х в ы х о ж д е н и е из цист м о ж е т п р о и з о й т и у ж е в к и ш е ч н и к е (полупаразиты). Культивирование паразити ческих а м е б с д е л а л о с ь о б ы ч н ы м в л а б о р а т о р ной п р а к т и к е п о с л е в в е д е н и я Б е к о м и Д р б о л а в о м ( В о е с к , D r b o h l a w ; 1925) я и ч н о - б е л к о в . среды; с в е р н у т а я смесь я и ч н о г о б е л к а и ж и д кости Л о к к а п о к р ы в а е т с я в п р о б и р к а х т о й же с м е с ь ю , н о ж и д к о й . П о а м е р и к а н с к о й т е р минологии о б о з н а ч а е т с я Е . L . A . (Egg-LockeAlbumen). Т в е р д а я часть среды Б е к - Д р б о лава без у щ е р б а д л я р о с т а м о ж е т б ы т ь з а менена а г а р о м с ж и д к о с т ь ю Р и н г е р а ( л у ч ше с прибавлением 1 % к р а х м а л а ) и л и N N N а г а р о м . П о К р е г у и Д ж о н у (Craig и J o h n ; 1927), е щ е л у ч ш и й р о с т п а р а з и т и ч е с к и х амеб получается на простой среде: челове ч е с к а я с ы в о р о т к а в смеси с ж и д к о с т ь ю Р и н гера или физиологич. раствором. Посев д л я получения культур производится в предва рительно нагретые пробирки петлей слизи и з с в е ж е в ы д е л е н н ы х faeces. Р о с т ч е р е з 24— 48 ч а с о в . М а т е р и а л д л я п р о с м о т р а б е р е т с я капилярной пипеткой с поверхности твер д о й с р е д ы . К а ж д ы е 24 ч а с а р е к о м е н д у е т с я осторожно сменять ж и д к у ю часть среды, в которой обильно размножаются бактерии и б л а с т о ц и т ы , п р и д а ю щ и е п р и своем р о с т е к и с л у ю реакцию среде. В культуре амебы питаются бактериями, при прибавлении эрит роцитов поглощают и их; иногда наблюдает ся образование цист. К у л ь т у р ы патогенны д л я молодых к о ш е к (иногда д а ж е вызывают образование у них печоночных абсцесов). Пересевы удаются легко в большом числе г е н е р а ц и й . Н а среде Б е к - Д р б о л а в а п о л у ч е ны к у л ь т у р ы следующих видов амеб: Ent. histolytica, Ent. coli (выращиваются труд н е е , ч е м E n t . h i s t o l y t i c a ) , E n t a m o e b a nana, Jodamoeba B i i t s c h l i i , Dientamoeba fragilis и E n t . g i n g i v a l i s , а т а к ж е Trichomonas v a g i nalis и з ж г у т и к о в ы х . И з п а р а з и т и ч е с к и х жгутиковых практическое значение д л я ди агностики при отрицательной микроскопии имеет к у л ь т и в и р о в а н и е Trichomonas i n t e s t i nalis. Хорошие р е з у л ь т а т ы дает способ Р е й х е н о в а (Reichenow) н а среде и з л о ш а д и н о й (можно и другой) сыворотки и физиологи ческого раствора. В пробирки засевают не с к о л ь к о см к р о в я н и с т о - с л и з и с т о й ч а с т и fae ces. П р и 37° р о с т н а 3-й д е н ь . Н е о б х о д и м п е р е с е в ч е р е з 3—5 д н е й , и н а ч е к у л ь т у р а г и б нет. П р и 25—30° длительность ж и з н и к у л ь т у р ы до 7 д н е й . М а т е р и а л д л я и с с л е д о в а н и я б е р е т с я со д н а п р о б и р к и . С менее в е р н ы м и р е з у л ь т а т а м и в ы р а щ и в а е т с я по способу Р е й хенова Chilomastix Mesnili. И з кишечных инфузорий культивирование Balantidium coli производится и л и на человеческой сы воротке, смешанной с физиол. раствором ( B a r r e t , Y a r b r o u g h ; 1921) ( п р о в е р к а п о Д о ф л е й н у и Р е й х е н о в у не у д а л а с ь ) и л и н а м я с ном б у л ь о н е с ч е л о в е ч е с к о й с ы в о р о т к о й , п р е д в а р и т е л ь н о з а с е я н н о й В а с . faecalis a l caligines (Reis; 1923). Р е к о м е н д у е т с я п р и б а в л е н и е к среде к р а х м а л а и л и д р . у г л е в о д о в . г Культивирование жгутиковых простей ших паразитов крови и тканей—лейшманий и трипаносом—производится на кровяных с р е д а х , г л . о б р . н а N N N - a r a p e (в п р о б и р к а х или чашках) или в бульоне с кровью. П р и культивировании на кровяных средах т р и п а н о с о м рост и х происходит в к о н д е н с а ц и о н н о й воде N N N - a r a p a , н а в л а ж ной поверхности чашек с NNN-агаром и л и в к р о в я н о м б у л ь о н е в в е р х н е м слое э р и т р о цитов. К р о в ь я в л я е т с я безусловно необхо димой частью среды. А г а р повидимому об ладает предохранительными функциями, свя з ы в а я кровяные антитела, а может быть и п р о д у к т ы обмена простейших. А г а р д о л ж е н о б л а д а т ь д о с т а т о ч н о й п л о т н о с т ь ю , но с о д е р ж а т ь много воды, чтобы обусловить об разование конденсационной жидкости. Л у ч ше в с е г о это д о с т и г а е т с я с м е ш и в а н и е м 1 % -