
* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки
219 ЛИПОИДЫ 22fr капель; б) ж и д к о с т ь Альтмана: 5%-ный раствор двухромовокислого калия, смешанный перед употреблением с равным объемом 2%-ной осмиевой к-ты.—-Фиксация продолжается 1—-3 дня, после чего следует суточная промывка в текучей воде, заливка в целлоидин или парафин и разложение на срезы. Большая часть Л . окрашивается при этом в черный цвет. Действию осмиевой к-ты могут быть подвергнуты не только кусочки непосредственно, но и полученные из них срезы (напр. при предварительной фиксации кусочков формалином). В наст, время осмий для изучения содержащихся в тканях Л . применяется редко, гл. обр. потому, что с одной стороны этим методом открываются не все виды Л . , а с другой—черную окраску принимает ряд структурных образований, не имеющих с Л . ничего общего. Наиболее употребительным в наст, время методом является о к р а с к а срезов, получаемых путем замораживания. Кусоч ки ткани толщиной до / —-1 см фиксируют 1—2 суток в 20%-ном растворе формалина С1 часть продажного формалина на 4 части водопроводной воды), после чего разлагают на замораживающем микротоме на срезы, толщиной в 10—15 ц. Д л я обнаружения об щего количества Л . срезы окрашивают раст вором Scharlachrot&a или Sudan I I I (насы щенный раствор краски в смеси равных объемов 70°-ного спирта и ацетона). Окраска продолжается 10—15 минут, после чего срезы споласкиваются в воде и докрашива ются гематоксилином. Л . окрашиваются в различные оттенки красного и красноватожелтого цвета (см. таблицу). Для сохране ния срезы заключают в гумми-сироп Апати (50 см воды, 50 г гуммиарабика, 20 г сахар ной пудры и кристаллик тимола) или в гли церин-желатину. Гумми-сироп дает возмож ность получить более прочные и постоянные препараты (срез вылавливается из воды на предметное стекло, слегка обсушивается, на него капают каплю гумми-сиропа и покры вают покровным стеклом). Для д и ф е р е н ц и р о в а н и я различ ных групп Л . существует ряд методов, из к-рых наибольшее значение имеют следую щие. О к р а с к а N i l b l a u s u l f a t&oM (насыщенный водный раствор краски); сре зы красят 10—15 минут, споласкивают в во де и диференцируют (лучше под контролем микроскопа) в слабом (1—5%) растворе ук сусной к-ты. Нейтральные жиры окраши ваются в розово-красноватый цвет, церебро зиды и фосфатиды—в голубовато-синеватый, мыла и жирные к-ты—в темносиний. Окра шенные срезы заключают в гумми-сироп и рассматривают немедленно после изготовле ния препарата; через нек-рое время окраска может довольно значительно измениться. Окраска Nilblausulfat&oM имеет значение для предварительной ориентировки в каче ственном составе имеющихся в ткани Л.— М е т о д Ф и ш л е р а (Fischler) применя ется для выявления жирных к-т и мыл. Сре зы, фиксированные в 20%-ном растворе фор малина, помещают на сутки в протраву (на сыщенный водный раствор Cupri acetici), промывают затем в воде и окрашивают гема токсилином, приготовленным следующим 1 2 3 образом: гематоксилина—1,0, абсолютного спирта—10 см , насыщенного раствора угле кислого лития—1 см , воды—&9 см . После промывки в воде срезы диференцируют жид костью Вейгерта (буры—-2,0, красной кро вяной соли—&2,5, воды—100 см ), промыва ют в воде и заключают в гумми-сироп. Жир ные к-ты окрашиваются в сине-черный цвет. Другой кусочек той же ткани фиксируют в 20%-ном формалине, насыщенном салициловокислым кальцием. Срезы из таких ку сочков окрашивают только-что описанным, способом, причем в черно-синий цвет поми мо жирных к-т окрашиваются в этом случае и мыла. Сравнивая препараты, полученные при описанных различных методах фикса ции, мояшо составить представление о соот ношении жирных к-т и мыл. Остальные ли поиды можно на тех я*е срезах докрасить. Scharlachrot&oM.—М е т о д Ч и а ч ч о (Ciaccio) основан на предварительном хроми ровании кусочков ткани, после чего часть Л . не извлекается при проведении кусочков, через спирты и ксилол. После фиксации ку сочка в течение 2 суток в смеси 80 частей 5%-ного двухромокислого калия, 20 частей формалина и 5 частей уксусной кислоты его перекладывают на несколько (5—6) дней в 3%-ный раствор двухромовокислого к а л и я , сутки промывают водой и заливают через ксилол в парафин. Освобожденные от пара фина срезы окрашивают Суданом. Окраску воспринимают фосфатиды и нек-рые смеси их, жирные к-ты, мыла и нек-рые другие Л . (см. таблицу).—М е т о д С м и т-Д и т р и¬ х a (Smith-Dietrich). Полученные путем за мораживания срезы хромируют 48 часов в термостате при 37° (в насыщенном растворе двухромовокислого калия), после чего их, предварительно промыв, красят при 37° не сколько часов в гематоксилине Кульчицко го и диференцируют в жидкости Вейгерта (см. выше способ Фишлера). В сине-черный цвет окрашиваются гл. обр. смеси фосфатидов, мыл и жирных к-т с холестерин-эстерами (см. таблицу).—О к р а с к а N e u t r a l г о t&ом (насыщенным раствором) мо жет быть применена для выявления мыл, жирных к-т и фосфатидов, к-рые окрашива ются в красный цвет (см. таблицу).—С п о¬ с о б Б е н д а (Benda) может быть приме нен для обнаружения мыл и жирных к-т (и нек-рых их смесей). Метод был предложен для окраски некрозов жировой ткани. Фик сированные в формалине кусочки режут на замораживающем микротоме и помещают на 2 дня в термостате при 37° в протраву Вей герта для невроглии (флюорохром и уксус нокислая медь). Мыла и жирные к-ты, об разующиеся в месте некроза жира, окраши ваются в зеленый цвет.—И с с л е д о в ание при помощи поляриза ц и о н н о г о м и к р о с к о п а дает воз можность выявить в первую очередь холе стерин и холестерин-эстеры. Они обладают двоякопреломляемостью, которая исчезает при нагревании и вновь появляется после охлаждения. Нек-рые фосфатиды обладают двоякопреломляемостью, не исчезающей при нагревании. Нейтральные жиры, мыла, жир ные кислоты двоякопреломляемостью не обладают (см. таблицу). Исследование при 3 3 3 3