* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

687 КРОВЬ б о л ь ш о й ц е н т р и ф у ж н о й п р о б и р к е п р и б а в л я ю т 5 0 см 10%-ного раствора К С г 0 ; осадок A g C r 0 центри­ фугированием и последующим отсасыванием собира­ ющейся над осадком жидкости промывают несколько р а з в о д о й и з а т е м р а с т в о р я ю т в 5 0 0 см концентрйрованнойН 8 0 ;6)петролейный эфир(t°кипения60—70°); 7) э ф и р н о - а л к о г о л ь н а я с м е с ь : 3 ч а с т и 9 5 % - н о г о а л ­ к о г о л я смешивают с 1 ч. э ф и р а (оба р е а к т и в а 2 р а з а п е р е г н а н ы ) ; 8) этилат н а т р и я , п р и б л и з и т е л ь н о п р а с ­ твор: 2—3 г металлического N a растворяют (охлаж­ д а я л ь д о м ) в 1 0 0 см абсолютного спирта (раствор сохраняют в темноте).— Х о д о п р е д е л е н и я . Э к с т р а к ц и я : к З см плазмы, помещенной в м е р и т е л ь н у ю к о л б у е м к о с т ь ю в 5 0 см , прибавляют постепенно, при постоянном помешивании, 40 см э ф и р н о - а л к о г о л ь н о й смеси (7), п о г р у ж а ю т в к и п я щ у ю в о д я н у ю б а н ю до н а ч а л а к и п е н и я , затем о х л а ж д а ю т и, долив до метки эфирно-алкогольной смесью, филь­ труют через обезжиренный фильтр. — О п р е д е л е н и е о б щ е г о к о л и ч е с т в а л и п о и д о в . В Э р л е н м е й е р о в с к о й к о л б е е м к о с т ь ю в 1 0 0 см к 1 5 — 20 см п о л у ч е н н о г о ф и л ь т р а т а п р и б а в л я ю т 2 см ра­ с т в о р а этилата н а т р и я (8) и н а г р е в а ю т н а водяной бане до и с ч е з н о в е н и я з а п а х а а л к о г о л я . От остатков алкоголя освобождаются просасыванием воздуха. К в я з к о м у с о д е р ж и м о м у д о б а в л я ю т 1 см H S0 (1:3), • нагревают на водяной бане 1 мин. и экстрагируют полученный р а с т в о р в течение 2—3 мин. п р и п о м о щ и 10 см к и п я щ е г о петролейного э ф и р а . Слив петролейн ы й э ф и р в м е р и т е л ь н у ю к о л б у е м к о с т ь ю в 25 см . экстракцию повторяют 3—4 раза порциями по 5 см , к-рые с л и в а ю т в т у ж е м е р и т , к о л б у . П о о х л а ж д е н и и ж и д к о с т ь доводят до метки петролейным э ф и р о м и з а ­ крывают пробкой экстракт № 1 (Э. 1). — О к и с л е н и е . 10 см э к с т р а к т а ( Э . 1) в ы п а р и в а ю т в Эрленмейеров­ ской колбе, снабженной притертой пробкой, до и с ­ ч е з н о в е н и я з а п а х а петролейного э ф и р а , от остатков к-рого о с в о б о ж д а ю т с я продуванием через колбу воз­ духа. К остатку прибавляют в качестве катализатора 5 см" р а с т в о р а х р о м о в о к и с л о г о с е р е б р а в с е р н о й к-те (5), 3 см п раствора двухромовокислого калия (2) и с т а в я т н а 5 м и н . в с у ш и л ь н ы й ш к а ф п р и t ° в 124°.—Ставят п р и тех я!е у с л о в и я х с л е п о й опыт с одними реактивами в качестве контроля. Вынув колбы, перемешивают покачиванием их содержимое, плотно прикрывают притертыми пробками и вновь ставят в ш к а ф на 10—15 мин. Вынув колбы, в них, н е о х л а ж д а я , н а л и в а ю т п о 7 5 см воды, 10 см 10%ного раствора K J и быстро титруют / раство­ ром гипосульфита, избегая перебалтывания в начале титрования во избежание потери иода. Под конец энергично перебалтывают, прибавляют раствора к р а х­ мала и титруют до исчезновения синей о к р а с к и . Р а з ­ н о с т ь в к о л и ч е с т в е см j раствора гипосульфита, истраченных на титрование после обработки одних р е а к т и в о в ( с л е п о й опыт) и анализируемой смеси, у к а з ы в а е т к о л и ч е с т в о см /ю раствора бихромата, п о ш е д ш и х н а о к и с л е н и е ж и р н ы х к-т и х о л е с т е р и н а . — П р и м е р . П р и т и т р о в а н и и в слепом опыте п о ш л о 33,0 см , с исследуемой п р о б о й — 23,45 см /ю раствора гипосульфита, ч т о соответствует 9,55 см 9 55 3 2 2 7 2 2 7 3 2 4 3 3 3 3 3 3 3 3 2 4 3 3 3 3 3 3 3 и 1 0 3 n w 3 к 3 3 и 3 п п р и п о с т о я н н о м п о м е ш и в а н и и 5 см К.; нагревают на водяной бане до кипения, кипятят 5 мин; охладив, доливают алкоголем до метки и фильтруют через обез­ ж и р е н н ы й ф и л ь т р ; 2 0 см фильтрата выпаривают до­ суха, остаток экстрагируют кипячением с небольшими п о р ц и я м и петролейного эфира, сливаемого в градуи­ р о в а н н у ю ц е н т р и ф у ж н у ю п р о б и р к у е м к о с т ь ю в 15 см . К о г д а о б ъ е м э к с т р а к т а с т а н е т р а в н ы м 1 0 см , его цен­ трифугируют, прозрачный центрифугат переливают в другую градуированную центрифужную пробирку, п о г р у ж а ю т ее в т е п л у ю в о д у и о с т о р о ж н о в ы п а р и в а ю т петролейный э ф и р , доводя объем э к с т р а к т а до 2 см . П р и л и в а ю т 7 см п е р е г н а н н о г о а ц е т о н а , 3 к а п л и н а с ы ­ щенного на холоде алкогольного раствора MgCl ; размешивают, центрифугируют, сливают п р о з р а ч н у ю ж и д к о с т ь и, п р о м ы в осадок ацетоном, растворяют е г о в 5 см в л а ж н о г о э ф и р а , с в о б о д н о г о от п е р е к и с е й . П р о з р а ч н ы й эфирный экстракт, количественно соб­ р а н н ы й в колбу для окисления, выпаривают, причем от о с т а т к о в э ф и р а о с в о б о ж д а ю т с я п р о с а с ы в а н и е м в о з ­ духа. Прибавив в к о л б у 5 см р а с т в о р а с е р е б р а (5) и 3 см и раствора двухромовокислого к а л и я (2), проводят окисление и последующее титрование, как описано выше (определение ж и р а и холестерина). Количество фосфатидов во взятой для анализа пора—Ъ 3 3 3 3 3 3 2 3 3 3 ции экстракта равно —^— мг, где а—число см 3 w / 10 раствора гипосульфита, пошедшее при титровании исследуемой пробы, Ь—число см / раствора гипосульфита, пошедшее при титровании в слепом о п ы т е , 3 — ч и с л о см i раствора бихромата, иду­ щ е е н а о к и с л е н и е 1 мг ф о с ф а т и д о в . — Д л я о п р е д е л е ­ ния ф о с ф о р а липоидов, по Б л у р у , к остатку после выпаривания алкогольно-эфирного экстракта крови, в з я т о г о в к о л и ч е с т в е 5 см , п р и б а в л я ю т 0 , 5 см смеси и з к о н ц е н т р и р о в а н н ы х с е р н о й и а з о т н о й к-т ( 1 : 1 ) и н а ­ гревают до получения бесцветного п р о з р а ч н о г о раст­ в о р а . Р а з б а в и в водой* нейтрализовав щ е л о ч ь ю и до­ в е д я в о д о й д о 5 см , в п о л у ч е н н о й ж и д к о с т и к о л о р и м е т ­ рически определяют ф о с ф о р (см. н и ж е ф о с ф о р крови). Лецитин содержит около 4 % фосфора. — О п р е ­ д е л е н и е х о л е с т е р и н а , по С. Г ь е р г и (SzentGyorgyi). Метод основан на осаждении свободного холестерина дигитонином и на взвешивании получен­ н о г о о с а д к а . В э к с т р а к т е К . ( с о о т в е т с т в е н н о 1 см ) хо­ лестерин осаждают прибавлением 1 см раствора д и г и т о н и н а (1 г к р и с т а л л и ч е с к о г о д и г и т о н и н а в 5 0 см 80 % - н о г о а л к о г о л я ) . П о л у ч е н н у ю с м е с ь в ы п а р и в а ю т н а в о д я н о й бане до половины объема, дают постоять п р и комнатной t° и через V ч а с а фильтруют под давле­ н и е м ч е р е з а с б е с т о в ы й ф и л ь т р . П р и п о м о щ и 7 см* 80 % - н о г о а ц е т о н а о с а д о к с м ы в а ю т в ц е н т р и ф у ж н у ю п р о б и р к у , п о г р у ж а ю т ее в в о д я н у ю б а н ю (t° в 4 5 — 5 0 ° ) , помешивают содержимое стеклянной палочкой и через 5 мин. центрифугируют. Отсосав жидкость через ас­ б е с т о в ы й ф и л ь т р [ р и с . 14 ( с т . 6 7 5 — 6 7 6 ) ] , о с а д о к п р о ­ мывают сначала 80%-ным, затем чистым ацетоном. Разболтав осадок в воде (t° в 50°), его полностью п е р е н о с я т н а тот ж е фильтр, воду отсасывают, оса­ док н а фильтре в ы с у ш и в а ю т и взвешивают. Д л я вы­ ч и с л е н и я количества х о л е с т е р и н а найденный вес осад­ к а у м н о ж а ю т н а 0,2431 (Windaus). 3 и 1 0 3 n 1 0 3 3 3 3 3 3 4 1ю р а с т в о р а б и х р о м а т а или & =2,65 мг олеиновой кислоты. — Д л я определения х о л е с т е р и н а д р у г и е 1 0 см э к с т р а к т а ( Э . 1) в ы п а р и в а ю т , к а к э т о описано выше. Для растворения остатка малыми порциями добавляют х л о р о ф о р м , слегка подогревают и д е к а н т и р у ю т в м е р и т е л ь н о м ц и л и н д р е н а 10 см . Повторив экстракцию 3 раза, доливают хлороформом д о 5 см , п р и б а в л я ю т 1 см у к с у с н о г о а н г и д р и д а и 0 , 1 с . м концентрированной H S 0 . Одновременно таким же путем обрабатывают стандартный раствор, содержа­ щ и й в 5 см х л о р о ф о р м а 0 , 5 мг х о л е с т е р и н а . Раство­ р ы п е р е м е ш и в а ю т , о с т а в л я ю т в т е м н о м м е с т е н а 15 м . и з а т е м к о л о р и м е т р и р у ю т . — Р а с ч е т: п о л у ч е н н о е к о ­ л и ч е с т в о мг х о л е с т е р и н а , у м н о ж е н н о е н а 3,92, вы­ ч и т а е т с я и з к о л и ч е с т в а см бихромата, пошедшего на окисление общего количества ж и р а и холестерина; р а з н о с т ь д е л и т с я н а 3 , 6 0 ( 3 , 9 2 — ч и с л о см /ю рас­ т в о р а х р о м о в о й к-ты, о к и с л я ю щ е е 1 мг холестери­ н а ; 3 , 6 0 — с р е д н е е и з 3 , 5 9 и 3 , 6 1 , т . е. ч и с е л , харак­ теризующих восстановительную способность пальми­ тиновой и олеиновой кислот). 3 3 3 3 г 2 4 3 3 3 м Минеральные вещества К. Гейбнер (Heubner) приводит следующую таблицу содер­ жания минеральных веществ в нормальной, плазме К. человека. Колебания Мин. вещества предель­ ные 320—400 (в мг%) средние 355 160 22 10 300 20 10 2,5 879,5 I Концентрация в эквивален. 0,100 0,026 0,005 0,002 0,130 0,005 0,005 0,002 0,133 К - Т 0,142 о с н о ­ ваний С1 . НСОз so . Н Р 0 4 4 — — 3—15 | ! К . Са Mg Сумма 280—320 16—24 8—16 1—4 Определение ф о с ф а т и д о в ( л е ц и т и н а и к е ф а л и н а , по Блуру). П р и н ц и п : липоиды, изолированные осаждением алкогольного экстракта крови ацетоном и хлористым магнием, окисляют х р о ­ м о в о й к - т о й . 1 мг л е ц и т и н а о к и с л я е т с я 3 , 1 1 см* / р а с т в о р а х р о м о в о й к - т ы , 1 мг к е ф а л и н а — 3 , 1 2 см ; другие липоиды обладают мало отличающейся вос­ с т а н о в и т е л ь н о й с п о с о б н о с т ь ю , что дает п р а в о Б л у р у п р и н я т ь д л я в с е х л и п о и д о в ф а к т о р , р а в н ы й 3 см /ю раствора б и х р о м а т а д л я 1 мг ф о с ф а л и п о и д а . & — В м е ­ тательную к о л б у е м к о с т ь ю в 1 0 0 см , содержащую 7 5 см п е р е г н а н н о г о 95 % - н о г о а л к о г о л я , п р и л и в а ю т и 10 3 3 и 3 3 У различных видов животных, а также в различных частях К. (плазма, сыворотка PI кровяные тельца) содержание минераль­ ных веществ неодинаково. Эти различия могут быть значительными, как это видно из анализов Абдергальдена.