* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

245 ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА 24в всего пользуются их квасцовыми соединения­ ми (см. Гематоксилин). Различают прогрес­ сивную и регрессивную окраски. Про­ г р е с с и в н о й о к р а с к о й называют та­ кую, при которой после красочной ванны препарат имеет уже окончательную степень окраски. Н а п р . основная краска M e t h y l g r i i n в подкисленном растворе дает очень чистую окраску ядер, совершенно их не перекра­ шивая и не окрашивая протоплазмы. П р о ­ грессивные окраски МОН-ЕНО получить также и кислыми красками; они служат гл. обр. для выявления соединительнотканных воло­ кон (это например Orcein по Unna, F u c h s i n S-пикриновая кислота по ван-Гизону).—Р ег р е с с и в н а я о к р а с к а всегда протекает в два стадия: 1) интенсивное и равномер­ ное перекрашивание всего объекта и 2) ди­ ференцировка препарата, которая заклю­ чается в удалении из среза излишней крас­ ки. Опыт показывает, что различные ткане­ вые и клеточные структуры раскрашивают­ с я неравномерно быстро; поэтому можно изолированно окрашивать какую-либо одну структуру. Пример регрессивного окраши­ вания—окраска ядалезным гематоксилином по Гейденгайну. В зависимости от степени диференцировки, при этом методе можно по­ лучить окраску ядер, фибрил, клеточных оболочек, митохондрий и т. п.—Другими методами можно получить изолированную окраску эластических волокон, миелиновых оболочек нервных волокон, фибрина и т. д. Чрезвычайно распространено окрашива­ ние препаратов во многие цвета (т. н. двой­ ная, тройная окраска). Простейшим случаем будет диффузная докрасна прогрессивно или регрессивно окрашенного препарата какойлибо кислой краской. Н а п р . после окраски гематоксилином, когда ядра имеют элек­ тивную синюю или черную окраску, прото­ плазму докрашивают кислыми красками: эозином, хромотропом и др. или смесью ван-Гизона (пикриновая кислота и фуксин). Многокрасочные препараты можно получить применяя (прогрессивно или регрессивно) смеси многих красок. Г о м о г е н н ы е с м е ­ с и содержат либо одни кислые краски, например смесь Унна « W E P » (Wasserblau, Eosin, P h l o x i n ) , окрашивающую прогрес­ сивно в голубой цвет—оболочки, в красный цвет—ядрышко и в тёмнокрасный—хрома­ тин, либо одни основные, например его же смесь M e t h y l g r i i n - P y r o n i n , применяемую р е ­ грессивно; результат окраски—зеленый х р о ­ матин, красные ядрышки и красная базофильная протоплазма. — Г е т е р о г е н н ы е с м е с и составляются из основных и кис­ лых красок. В качестве примеров можно привести смесь Бионди-Эрлих-Гейденгайна, состоящую из одной основной и двух кислых ( M e t h y l g r i i n , F u c h s i n S, Orange G ) , и краску Гимза, составленную из двух основных и одной кислой красок ( M e t h y l e n b l a u , A z u r I , Eosin). В смеси краски не остаются индиферентными друг к другу, а дают соединения, легко выпадающие из раствора. Такие смеси кислых и основных красок называют иногда нейтральными смесями. Окраску можно производить не только на срезах, но и на ц е л ы х к у с о ч к а х т к а ­ н и до заключения их в среду для резки. Т. о . получаются уже готовые окрашенные срезы. Прокрашивание кусочков можно ко­ нечно комбинировать с дополнительной докраской срезов. Методы тотальных окрасок применяются гл. обр. при зоологических и эмбриологических работах. Наиболее из­ любленной краской в этом отношении яв­ ляются борный и квасцовый кармины и гемалаун. Описанным комбинированием р а з ­ личных кислых и основных красок, а также протрав исчерпываются главные методы гист. окрасок. Относительно специальных методов окраски см. ниисе—гистохимия. Методы и м п р е г н а ц и и м е т а л л а м и не являются окрасками в собственном смыс­ ле этого слова, хотя и служат для тех же целей гистолог, и цитолог, диференциров­ ки. Принцип импрегнации основан на том, что различные органоиды удерживают соли нек-рых тяжелых металлов в очень различ­ ной степени. Практически поступают так: кусочки помещают в растворы этих солей, а через известный промежуток времени соли восстанавливают до металла. Пример им­ прегнации—серебрение клеточного аппара­ та Гольджи (см. Гольджи метод) по Рамони-Кахалу ( R a m o n у C a j a l ) . Методы импре­ гнации разработаны гл. о б р . для нервной ткани (см. Нервные клетки, Белъшовского ме¬ тод);они очень многочисленны и часто очень сложны, но в принципе остаются теми ж е . Окрашенный или импрегнированный срез должен быть заключен в просветляющую­ ся среду с целью пропитать препарат сре­ дой, имеющей коеф. преломления, близкий к стеклу, и устранить так. обр. лучерассеяние. Для этого применяются: глицерин, гли­ церин-желатина, гумми-арабик, левулеза, различные масла; наиболее распростране­ но заключение в канадский бальзам. После­ довательность заключения препарата в ка­ надский бальзам такова: после окраски пре­ парат переводится через спирты возрастаю­ щей крепости в абсолютный спирт и нако­ нец в чистый ксилол; затем на препарат наносится капля бальзама, и препарат за­ крывается покровным стеклом. Толщина стекла не должна превосходить 150 fi, т. к. иначе объективами микроскопа с малым фо­ кусным расстоянием не удастся исследовать объект. Если препарат заключают в среду, растворяющуюся в воде, никаких промежу­ точных сред не нужно. Гумми-арабик или глицерин-яселатина наносятся на срезы сра­ зу после окраски и промывки препарата. Теоретические основы Г. т. Ф и к с а ц и я . Зафиксировать ткань, абсолютно ее не изме­ нив,—задача конечно невыполнимая. Поэто­ му нужно стремиться зафиксировать так, чтобы структурные изменения можно бы­ ло учесть. П р и изучении же тонких струк­ тур клетки этого достигнуть очень трудно, и поэтому желателен контроль путем при­ жизненного наблюдения. П р и фиксации, приводящей обычно к полной и необратимой коагуляции протоплазмы, всегда необходи­ мо считаться с артефактами потому, что при этом вызывается изменение физ. состояния коллоидов клетки, при чем изменяется их дисперсность, и наступает разложение лиофильных смешанных коллоидов. Морфоло­ гический характер коагулята протоплазмы