
* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки
6»1 БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ 692 лучше, то препараты предварительно под вергаются т. н. фиксированию, т. е. обра ботке разного рода физич. и хим. агентами, быстро убивающими протоплазму—• ж а р о м , спиртом и т. д. Иногда материал микроскопируется и без предварит, обработки, когда требуется по ходу анализа изучение под ми кроскопом живых микробов (наблюдение по движности и х , отношения к О и п р . ) . В та ких случаях приготовляется препарат в ви де т. н. висячей капли. Наблюдение ведется или обычным способом или при затемненном поле зрения микроскопа. П р и исследовании на присутствие Protozoa весь анализ огра ничивается одним микроскопированием, что считается достаточным, т. к. методы куль тивирования протозоа очень сложны и в широкую практику еще не вошли. В бакте риологии анализ не останавливается на изучении формы микроба. Необычайно ши р о к а я изменчивость бактерий при ничтож нейших изменениях окружающей среды, прежде всего отражается на форме их; изу чение только одной формы микробов при вело бы к грубейшим ошибкам при опреде лении их вида. Поэтому, для суждения о виде микроба необходимо знание, кроме морфологии,—и всех его биол. особенностей, его биохим. и иммунологических свойств, а для патогенных—и результата опыта на ж и вотном; только совокупность всех этих дан ных дает возможность б. или м. точно иден тифицировать того или иного микроба, опре делить вид и тип его. Этому и служит вся бактериологическая техника. К у л ь т и в и р о в а н и е м и к р о б о в на искусственных питательных субстратах для изучения их биохим. свойств является глав нейшим моментом Б . а. В настоящее время такое культивирование встречает еще ряд затруднений. Многих микробов и теперь еще нельзя получить в искусственных культу р а х . Препятствием служит ряд условий, за ключающихся в необычайном разнообразии микробного мира, в резко выраженной спе цифичности биохим. функций микробов и вытекающей отсюда их изменчивости. Наше незнание многих из этих условий не дает возможности подобрать такие питательные среды, к-рые всегда были бы пригодны. Тем не менее, именно культивирование доступ ных нам микробов является основным ме тодом их Б . а. В наст, время Б . а. начинает ся с получения отдельных микробов, под лежащих изучению, в чистых культурах, т. е. в культурах, состоящих из одного вида микроба, без примеси какого-либо другого. Достигается это тем, что материал, подле жащий изучению, распределяется на поверх ности твердых питательных сред. Это рас пределение имеет целью отделить микробов друг от друга. Через известный период вре мени, чаще всего через сутки, на тех местах субстрата, на которых оказались микробные клетки, образуются скопления микробов, т. н. колонии разросшегося микроба. Эти колонии у многих микробных видов имеют очень характерную форму, чем и пользуют ся для первого ориентирования в составе микробной флоры. Отдельные колонии из влекаются и переносятся на подходящие пи тательные среды для дальнейшего культи вирования. Предполагается, что каждая ко лония вырастает из одной клетки; но это бы вает не всегда, и последнее время все больше и больше в практику входит способ получе ния колоний из заведомо одной микробной клетки. Такое отделение микроба произво дится под контролем глаза в микроскопе с помощью прибора, называемого м и к р о м а н и п у л я т о р о м . Т . к . материал, под лежащий обследованию, заключает в себе огромное количество разнообразных микро бов, выделить же необходимо одного опре деленного из них, то в таких случаях приме няются особые питательные среды. В по следних или содержатся хим. вещества, вступающие между собой во взаимодействие под влиянием роста микробов, что обнару живается каким-либо легко доступным про явлением, напр., изменением цвета, выпа дением или растворением осадка (среды Эндо, Дригальского, среды с мелом, с кро вью), или эти среды заведомо благоприят ствуют росту искомого микроба и пода вляют рост микробов сопутствующих, напр., среды обогащения для тифа, дифтерии. Только после такой предварительной обра ботки получают чистые культуры. В тех случаях, когда искомый микроб находится в исходном материале в очень незначитель ном количестве и трудно поддается непо средственному культивированию, прибега ют к опыту на животных ( t b c ) . Материал впрыскивают животному, и после того, как разовьются характерные для данного ми кроба пат. изменения, выделяют чистую культуру. Получив чистую культуру, при ступают к изучению биохим. особенностей данного микроба. Т . к. состав питательных сред очень слоиган, то для изучения биохи мии к средам прибавляются различные, хи мически более простые вещества, измене ния которых под влиянием роста микробов легко могут быть обнаружены прибавлением какого-либо индикатора—лакмуса,нейтральрота и др. Для этой цели служат различные углеводы, моно-, ди-, полисахариды и много атомные спирты, а также желатина и кровь (эритроциты). Н а основании изменения того или иного из этих веществ заключают о биохимич. особенностях данного микроба. Громадное значение при определении вида микроба имеет и м м у н о л о г и ч е с к и й ме тод, основанный на способности животного организма крайне специфически реагировать на парэнтеральное введение инородных бел ков образованием и накоплением в крови различных т. н. антител. Сыворотка крови таких животных и служит реактивом. В ней присутствие этих антител легко может быть обнаружено рядом простых реакций. Неко торые из этих реакций получили широкое распространение и являются обязательными при идентификации микробных видов. Эти реакции—агглютинация, преципитация и реакция отклонения комплемента. Для непатогенных микробов Б . а. на этом может быть закончен. Для микробов же патоген ных обязателен еще эксперимент на живот ном, особенно при обнаружении нового ви да. Идеалом определения всякого патоген ного микроба является получение у подхо дящего животного патологич. изменений,