* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки
метотрексат разоруженные векторы и плазмиды. В этих векторах многие гены заменены на маркерные и хозяйственно полезные. Использование векторов позволяет переносить чужеродные гены в клетки растений и затем регенерировать нормальные фертильные растения, в большинстве случаев – с использованием методов изолированной культуры. методы реконструкции филогении * метады рэканструкцыі філагеніі * ?hy? l?g?nic ??c?n?t??cti?n ??th?d? – методы восстановления эволюционных взаимоотношений между объектами, построения древа филогении, на основе данных молекулярно-генетического анализа. Существуют три группы таких методов, основанные 1) на расстоянии, 2) на принципе минимальной эволюции и 3) на принципе максимального правдоподобия. Сущность каждого из них заключается в следующем. 1. Методы, основанные на матрице расстояний (м. р.) между объектами, состоящие в итеративной кластеризации объектов по м. р. Наиболее широко используется метод UPGMA (unw?ight?d pair-group ??thod), когда расстояние между кластерами определяется как среднее всех попарных расстояний между членами кластеров. В методе «объединение соседей» (n?ighbor-joining ??thod) минимизируется суммарная длина древа. 2. Методы максимальной парсимонии, или принцип «минимальной эволюции» (principl? of ?ini?u? ?volution). Для каждой возможной топологии из набора анализируемых последовательностей в качестве узла древа выбирается такая последовательность, которая требует минимальных изменений для перехода к непосредственным потомкам. Далее для каждой топологии подсчитывается суммарное число изменений и выбирается древо, соответствующее минимальному их числу. 3. Методы максимального правдоподобия. Для каждой возможной топологии длина ветвей выбирается так, чтобы максимизировать вероятность данного древа на основе исходных данных. Затем среди всех возможных выбирается наиболее вероятное древо. 525 методы липосомной трансфекции * метады ліпасомнай трансфекцыі * li??? ???? t?an?f?cti?n ??th?d? – см. Липосомы. методы физической трансформации * метады фізічнай трансфармацыі * ?hy?i? cal t?an?f???ati?n ??th?d? – физические методы доставки чужеродной ДНК в ядро клетки-мишени: 1) микроинъекция – применяется в настоящее время в основном для создания трансгенных животных путем введения экзогенной ДНК в пронуклеус оплодотворенной яйцеклетки; 2) электропорация – кратковременное воздействие сильным электрическим полем; 3) лазерный метод – воздействие лучами лазера при культивировании клеток in vitro; 4) метод бомбардировки – перфорация клеточных мембран золотыми или вольфрамовыми микрочастицами, конъюгированными с чужеродными ДНК и разогнанными до высокой скорости. методы химической трансфекции * метады хімічнай трансфекцыі * ch??i? cal t?an?f?cti?n ??th?d? – методы, отличающиеся от физических тем, что для них не требуется специальная аппаратура, а необходимо применение простых химических связей высокой частоты и плазмидной ДНК, очищенной в градиенте плотности хлористого цезия, возможно, в виде суперкольца. Обработка химическими веществами способствует облегченному проникновению ДНК в клетки путем эндоцитоза. Декстрановый метод предполагает инкубацию трансфецированных клеток в среде с экспрессирующим вектором, содержащим ДНК и ДЕАЕ-декстран. Поликатион ДЕАЕ-декстран стимулирует неспецифический клеточный эндоцитоз и уравновешивание отрицательного заряда клетки ДНК. Классическим методом введения ДНК в клетки in vitro является комплекс с кристаллическим фосфорнокислым кальцием Ca(P?4)2. Методика предполагает получение преципитатов ДНК-Ca(P?4)2 и инкубирование с клетками-реципиентами. метотрексат * метатрэксат * ??th?? t??xat? ?? Mtx ?? 4?a?in??10???thylf?lic acid – антагонист фолиевой кислоты, который обладает генотоксическим эффектом,