* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

гИБРИДИЗАцИЯ БЛЯШЕК клеток. Может осуществляться в пределах одного вида и между разными систематическими группами. Г. может также происходить при слиянии соматических клеток с формированием общего ядра, при этом спонтанная частота этого явления очень низка и требует особых условий (напр., пониженная температура) или специальные среды. Такая Г. возможна между клетками очень далеких видов, напр., гибриды между клетками человека и курицы. гибридизация in situ * гібрыдызацыя in situ * hybridization in situ – см. In situгибридизация. гибридизация in situ флуоресцентная * гібрыдызацыя in situ флуарэсцэнтная * fluorescent in situ hybridization or FISh – вариант метода, при котором в качестве зондов используются препараты ДНК, ме, ченные флуорохромами. Современный ва. риант неизотопной гибридизации in situ. Этот метод разработан в Ливерморской национальной лаборатории США в 1986 г. и нашел применение в различных отраслях биологических, медицинских и сельскохозяйственных исследований. Особенности проведения FISH-гибридизации состоят в том, что хромосомы-мишени, отобранные для гибридизации, окрашивают флуоресцентными красителями. При одноцветном окрашивании, как правило, используют флуоресцеин-изотиоцианат (FITC), который дает зеленое окрашивание. Краситель конъюгированно соединяют со стрептавидином (синтетический аналог авидина). Остальные хромосомы окрашиваются ДНКспецифичными красителями (DAPI синего цвета или родамин красного цвета), причем их центромеры также окрашиваются флуорохромом (напр., Texas или AMCA), и они отличаются от «меченых» и «немеченых» хромосом. Цитогенетический анализ проводится под люминесцентным микроскопом в ультрафиолетовых лучах. Возможно проведение двойной или даже множественной гибридизации, когда одновременно указывается локализация двух (и более) различных генов в разных хромосомах. Методика FISH имеет ряд преимуществ перед другими генами. Во-первых, 291 это высокая чувствительность. При использовании зеленого света во флуоресцентной микроскопии способность к разделению составляет 0,25 мкм (для сравнения, способность 32Р-автографии – 1 мкм, для 125 J – 4 мкм). При работе с флуоресцентной меткой относительно легко подсчитывается количество гибридизированной нуклеиновой кислоты – микрофлуориметрично или методом количественной фотографии при помощи сканирующей денситометрии фотографических негативов. Преимуществом метода FISH является точность и высокая скорость цитогенетического анализа (без использования автоматизированных систем – 200–300 метафаз в день), что на порядок выше, чем во время анализа дифференциально-окрашенных хромосом. Недостатком этого метода является то, что молекула флуорохрома может быть присоединена только к одной молекуле РНК или ДНК. Т. е., чувствительность метода будет зависеть как от размеров гена, так и от количества его копий и специальной активности зонда. Чувствительность метода повышают, применяя FITC-глобулины, которые называют антифлуоресцентными антителами. Они способны образовывать комплексы с гаптенами и присоединяться к РНК-зонду, усиливая флуоресценцию. Значительным недостатком FISH-метода является высокая стоимость исследований, что ограничивает его широкое применение. гибридизация аллопатрическая * гібрыдызацыя алапатрычная * allopatric hybridization – гибридизация дифференцированных видов в зоне между двумя географическими областями (см. Гибридизации зоны) вследствие нарушения географической изоляции. гибридизация бляшек, методика Бентона–Дэвиса * гібрыдызацыя бляшак, методыка Бентана–Дэвіса * plaque hybridization or Benton–Davis’ technique – одна из модификаций гибридизации по Саузерну. Бляшки бактериофага на поверхности агара переносят на нитроцеллюлозный фильтр или др. подходящий ДНК-связывающий матрикс путем аккуратного наложения фильтра на поверхность агара. Небольшое