* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

250 гЕННАЯ ТЕРАПИЯ чЕРЕЗ ПЕчЕНЬ назначенные для придания трансформированным клеткам селективных преимуществ. Напр., при Г. т. рака пытаются вводить для этой цели гены множественной устойчивости к лекарствам (VDR) в клетки костного мозга. Отдельные результаты показывают возможность применения гепатоцитов в качестве мишеней Г. т. Но данное направление не лишено недостатков: гепатоциты имеют сравнительно непродолжительную жизнь в печени. Необходим поиск стволовых клеток, предшествующих гепатоцитам, которые позволили бы продлить жизнь трансгена. Уже найдены незрелые, т. н. овальные, клетки, расположенные в желчных протоках, которые являются предшественниками как гепатоцитов, так и клеток эпителия желчных протоков. Доказательства такого предположения окончательно еще не получены. Не все попытки применения Г. т. ч. п. связаны с успехом, как в случае гиперхолестеринемии или тирозинемии. Так, генно-терапевтическое лечение фенилкетонурии – еще отдаленная клиническая перспектива. Эта распространенная болезнь метаболизма чаще всего вызывается дефектом единственного гена – фенилаланингидроксилазы. В результате фенилаланин не может превращаться в тирозин. А биологическим следствием этого дефекта является умственная отсталость, которую можно предотвратить путем специальной детской диеты. Поэтому всех детей проверяют при рождении на фенилкетонурию и затем вовремя начинают диетическое вмешательство. Один ген, но фермент, кодируемый им, требует для своей активности наличие кофакторов, которые синтезируются в печени. Из-за сложности данной системы исследования проводятся пока только на моделях. Еще пример, связанный с Г. т., нацеленной на печень, – гемофилия В. Она вызывается дефицитом одного из факторов свертываемости крови, фактора IX, который синтезируется и секретируется в кровь из печени. Болезнь поражает 1 из 30 000 мужчин. Были проведены успешные опыты на собаках с использованием ex vivo стратегии с доставкой в гепатоциты кДНК, кодирующей фактор модель, которая позволяет избежать низкой эффективности введения генов в клетки печени, и делает Г. т., нацеленную на печень, существенно более реальной. Болезнь вызывается дефектом в гене, ответственном за синтез одного из ферментов, вовлеченных в деградацию тирозина, фумарилацетоацетат гидролазы (FAH). В результате в гепатоцитах накапливаются токсичные и мутагенные продукты и в дальнейшем развиваются болезни печени, включая ранний рак. Была создана трансгенная мышь с нокаутированным геном, кодирующим этот фермент. Гомозиготные нокаутированные мыши погибали на 12-й день после рождения. Они хорошо моделировали наиболее острую форму HTI. Животному вводили препарат, который уменьшает гепатотоксичность у больных HTI. Это лекарство спасало мышей от ранней смерти. Гепатоциты, в которых будет экспрессироваться нормальный фермент FAH, должны иметь преимущества в скорости роста по сравнению с гепатоцитами, в которых этот ген не функционирует. Действительно, трансплантация больной нокаутированной мыши всего 1000 гепатоцитов, взятых от конгенной мыши, экспрессирующей нормальный фермент, приводила к потрясающему результату: в печени больного животного появлялось огромное количество гепатоцитов (конгенная мышь отличалась от данной мыши только в области гена, кодирующего FAH). И когда ей вводили в воротную вену гепатоциты, трансформированные ретровирусом, содержащим здоровый ген, результат был аналогичным. В результате больное животное приобретало нормальную функцию печени и спокойно выживало без обработки препаратом. Этот пример демонстрирует важность обеспечения селективных преимуществ клеткам, которые несут здоровый ген после генно-инженерных манипуляций. Они постепенно вытесняют немодифицированные больные клетки, давая больному тот продукт, от отсутствия которого он страдает. Такие селективные преимущества можно заранее предусматривать, вводя наряду с геном-исцелителем гены, специально пред-